以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
FGFR抑制劑(FIIN-3) | FIIN-3 | 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
FIIN-3是FGFR的不可逆抑制劑,對FGFR1,F(xiàn)GFR2,F(xiàn)GFR3和FGFR4的IC50值分別為13.1,21,31.4和35.3nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1637735-84-2 純度:96.47% 分子量:691.61 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
小鼠轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TNPO1)ELISA試劑盒 ,英文名: TNPO1 ELISA Kit
犬轉(zhuǎn)移生長因子β1(TGF-β1)ELISA檢測試劑盒Canineansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit 96T/48T
犬血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)免疫試劑盒 Dog Angiotensin-conveing enzyme 2,ACE2 ELISA kit
英文名稱FDP纖維蛋白降解產(chǎn)物規(guī)格:96T/48T
腸致病性大腸桿菌(EeropathogenicE.coli)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測試劑盒20次
Ratglialcellline-derivedneuroophicfactor,GDNFELISA試劑盒大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-2 ELISA Kit
大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA檢測試劑盒RatEotaxin1ELISAKit 96T/48T
人TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)免疫試劑盒 Human TIEG1 ELISA Kit
英文名稱MouseHeatShockProtein70ELISAKit小鼠熱休克蛋白70(HSP70)規(guī)格:96T/48T
ITC紅色熒光光標(biāo)記一抗50微克
rabbitneuroophin4,-4ELISA試劑盒兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human maix metalloproteinase 11 (MMP11) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA試劑盒
RabbitOncostatin-M,OSMELISAKit 兔抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforAi-GAD谷氨酸脫羧酶抗體(間接法二步法)規(guī)格:48T/96T
血液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性比色法定量檢測試劑盒20次
PorcineHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
FGFR抑制劑(FIIN-3)Sphingomyelin Synthase 1 英文名稱: 鞘磷脂合成酶1抗體 0.2ml
EEF1D 英文名稱: 延伸因子EF-1δ抗體 0.2ml
促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39)抗體 Anti-ACTH 0.1ml
Anti-IL-17/RBITC(Interleukin-17) 羅丹明標(biāo)記白細(xì)胞介素17抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-FGFR1+FGFR2 (Tyr463) 磷酸化堿性成纖維細(xì)胞生長因子受體1抗體 規(guī)格 0.1ml
CPT1A peptide 肉毒堿棕櫚?;D(zhuǎn)移酶1A多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg