商品介紹:
BAR501是高效選擇性的GPBAR1激動(dòng)劑,EC50值為1μM. 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1632118-69-4 純度:98.82% 分子量:406.64 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
N-乙?;咸烟牵?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): NilotinibC-藻藍(lán)/藻藍(lán)蛋白/藻青蛋白抗體包裝25g
Nateglinide(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Spiramycin色P450 1A1抗體包裝5g
Nifedipine(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Spiramycin絲/蘇蛋白質(zhì)激II α抗體包裝1mg
Norepinephrine Bitartrate(標(biāo)...英文名稱(chēng): Spironolactone2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框66抗體包裝5mg
Norethindrone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): SpironolactoneCULLIN抗體包裝25mg
O,P-滴滴滴(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Carbamazepine小牛胸腺DNA抗體包裝5mg
P-基異酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Carbamazepine1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框226抗體包裝25g
Phenformin hydrochloride(標(biāo)準(zhǔn)...英文名稱(chēng): Carboplatin組織蛋白L抗體包裝5g
Phenylrine hydrochloride...英文名稱(chēng): Carboplatin絲/蘇蛋白激II β抗體(casein kinase IIβ)包裝100g
Pioglitazone HCl(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Vincristine Sulfate角蛋白18抗體包裝25g
Prednisolone acetate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Vincristine Sulfate轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1結(jié)合蛋白抗體包裝10g
Prednisolone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Pazopanib22號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框45抗體包裝50g
Prednisone Acetate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Felodipine22號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框32抗體包裝100g
Prednisone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): FelodipineCD5L抗體包裝25g
Pregnenolone Acetate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 6-TG/ThioguanineCD6抗體包裝500g
靈芝菌Ganoderma│lucidum (Curtis) P. Karst. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血紅蛋白H試劑盒雪膽 ;Curcurbitacin
: ATCC51331資源名稱(chēng): 嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%血紅蛋白C試劑盒纈草三酯;Valtrate
乳乳球菌Lactococcus│lactis 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP/BP血紅蛋白試劑盒香荊芥酚;5-Isopropyl-2-m
GPBAR1激動(dòng)劑(BAR501)纖維連接蛋白抗體大豆,黃豆苷元(標(biāo)準(zhǔn)品) Ammonium molybdate, tetrahydrate
FosB蛋白抗體大風(fēng)子(標(biāo)準(zhǔn)品) Ammonium phosphomolybdate , hydrate
FRA2/FOSL2抗體大腹皮(標(biāo)準(zhǔn)品) Ammonium sodium phosphate
叉頭蛋白P3抗體大果木姜子(標(biāo)準(zhǔn)品) Ammonium succinate
成纖維生長(zhǎng)因子8抗體大紅袍(標(biāo)準(zhǔn)品) Ammonium thiosulfate
肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Fascin抗體大黃(掌葉大黃)(標(biāo)準(zhǔn)品) Amprolium hydrochloride
線(xiàn)粒體裂變1蛋白抗體大黃(藥用大黃)(標(biāo)準(zhǔn)品) Antimony (III) oxide
叉頭蛋白P1抗體大黃酚(標(biāo)準(zhǔn)品) Azomethine-H monosodium salt
鼠疫F1蛋白/鼠疫耶爾森氏菌莢膜抗原F1單克抗體大黃酚-8-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Azure C