公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:ROCK激酶抑制劑(SAR407899)
英文名稱:SAR407899
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
SAR407899是ROCK激酶高效選擇性抑制劑,對人源和屬源ROCK的Ki值分別為36nM和41nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:923359-38-0 純度:98.43% 分子量:244.29 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
冬蟲夏草英文名稱: DL-beta-Phenylalanine胚胎干相關(guān)蛋白FOPNL抗體包裝5g
冬蟲夏草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DL-Carnitine hydrochloride磷化癌基因FOS蛋白B抗體包裝1g
冬凌草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DL-Ornithine, monohydrochloride叉頭蛋白D2抗體包裝1mg
冬凌草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DL-Tartaric acid hydrate叉頭蛋白E3抗體包裝100mg
冬青苷D英文名稱: D-Malic acid叉頭蛋白F2抗體包裝1g
豆腐果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DMS叉頭蛋白H1抗體包裝500mg
豆甾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-Norleucine叉頭蛋白I1抗體包裝1g
豆甾葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dopamine hydrochloride磷化叉頭蛋白4抗體包裝250mg
胡蘿卜英文名稱: DST單跨膜蛋白FOXRED1抗體包裝1g
獨活(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: dUTPFOXRED2蛋白抗體包裝5g
味(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ectoine巖藻糖1磷鳥苷酰轉(zhuǎn)移抗體包裝5g
杜鵑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Eschka's mixture外基質(zhì)蛋白FREM1抗體包裝100g
杜仲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ethyl dodeconoate原癌基因FRAT1抗體包裝25g
杜仲葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ethyl eosin叉頭蛋白D1抗體包裝5g
短葶山麥冬皂苷C英文名稱: Ethyl gallate11重鏈抗體包裝1g
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:含量97.0%-101.5%,II型神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4試劑盒去氧穿心蓮內(nèi)酯;Deoxyandrogr
: ivcas7.00211資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3試劑盒羥基積雪草;madecassic ac
植物乳桿菌Lactobacillus│plantarum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2試劑盒羥基芫花;hydroxygenkwan
ROCK激酶抑制劑(SAR407899)血管非炎癥分子1抗體輔 Q10 COENZYME Q10(Synthetic)(P)Human, Mouse, Rat
血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體秋水仙 COLCHICINE(RG)Human, Mouse
血管內(nèi)皮生長因子C型抗體秋水仙 COLCHICINE(RG)Human
囊泡相關(guān)膜蛋白3抗體輔 Q10 COENZYME Q10(Natural)(P)Human
空泡分選蛋白18抗體輔 Q10 COENZYME Q10(Natural)(P)Human, Mouse
磷化波形蛋白抗體輔 Q10 COENZYME Q10(Natural)(P)Human, Mouse, Rat
磷化波形蛋白抗體苦漿果 COCCULIN(SEE PICROTOXIN)(RG)Human, Mouse
鳥苷轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體輔 B12/腺苷鈷 ADENOSYLCOBALAMINE(COENZYME B12)(P)Human
磷化鳥苷轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體輔 B12/腺苷鈷 ADENOSYLCOBALAMINE(COENZYME B12)(P)Human, Mouse