產(chǎn)品屬性:
中文名稱:HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(Doravirine)
英文名稱:Doravirine
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Doravirine是一種新型的非核苷的HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑. 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1338225-97-0 別名:MK-1439 純度:98.0% 分子量:425.75 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
益母草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ac-Trp-Oet磷化熱休克蛋白70抗體包裝1g
益智(益智仁)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-Acetyl-DL-tryptophanE3泛蛋白連接HACE1抗體包裝5g
益智(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nalpha-Formyl-DL-tryptophan結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體包裝250mg
薏苡仁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Tyrosine tert-butyl ester 肝核因子4α抗體包裝1g
薏苡仁油(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: O-Benzyl-L-tyrosine磷化肝核因子4α抗體包裝100g
茵陳(濱蒿)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: O-Benzyl-L-tyrosine benzyl ester hydrochloride淋巴特異性解旋抗體包裝25g
茵陳(茵陳蒿)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: O-Benzyl-L-tyrosine methyl ester hydrochlorideHRAS樣抑制因子2抗體包裝5g
茵芋苷英文名稱: L-Valine t-butyl ester hydrochloride熱休克蛋白家族40抗體包裝1g
羊藿(羊藿)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 4-Nitro-L-phenylalanine monohydrate糖蛋白P43抗體包裝5MG
羊藿次苷F2英文名稱: N-Acetyl-DL-Alanine滋養(yǎng)層抗原3β7抗體包裝5g
羊藿次苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ac-DL-Glu-OH熱休克蛋白-22抗體包裝25ml
羊藿苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DL-a-Aminoadipic acid組織H4受體抗體包裝5ml
羊藿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DL-Cysteine·HCl·H2O羥基類固脫氫11β2抗體包裝100g
羊藿新苷A;羊藿屬苷A英文名稱: DL-Cysteine hydrochloride組織H3受體抗體包裝25g
銀椴苷;椴樹苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DL-Cystine磷化組蛋白H1抗體包裝1g
米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:效價測定硫角質(zhì)試劑盒基麥冬黃烷B;Methylophio
: =DSM24164=BCRC80272資源名稱: 中國臺灣鞘單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,MAO-B selective inhibitor硫雌試劑盒基麥冬黃烷A;Methylophio
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>98%硫嘌呤S-基轉(zhuǎn)換試劑盒7-氧基;7-Methoxyco
HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(Doravirine)抑癌蛋白EZH2抗體鉤藤(標(biāo)準(zhǔn)品) (±)-α-Tocopherol nicotinate
DNA修復(fù)Ku70抗體鉤吻(標(biāo)準(zhǔn)品) Fluorescein-5-maleimide
DNA修復(fù)Ku-80抗體鉤吻子(標(biāo)準(zhǔn)品) Veliparib (ABT888)
14號染色體開放閱讀框106抗體狗脊(標(biāo)準(zhǔn)品) Nafcillin sodium salt monohydrate
腦蛋白9抗體枸杞子(標(biāo)準(zhǔn)品) Nafcillin sodium salt monohydrate
通道相互作用蛋白2抗體枸櫞血根 Atosiban Acetate
劍蛋白p60亞A1抗體構(gòu)骨葉(標(biāo)準(zhǔn)品) Trelagliptin free base
Kazrin蛋白抗體構(gòu)樹A(標(biāo)準(zhǔn)品) Cefotaxime Sodium
離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體古倫賓(標(biāo)準(zhǔn)品) Cefotaxime Sodium
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)