以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
商品介紹:
11beta-Hydroxyprogesterone是11β-羥基甾類脫氫酶(11β-Hydroxysteroid dehydrogenase)的有效抑制劑;同時在COS-7細胞中激活人類鹽皮質(zhì)激素受體,ED50值為10nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:600-57-7 別名:11β-Hydroxyprogesterone 純度:98.0% 分子量:330.46 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
茶黃-3'-沒食子酯英文名稱: Potassium pyrophosphate, tetrabasic叉頭蛋白G1抗體包裝250mg
茶黃-3-沒食子酯英文名稱: Potassium tungstate, dehydrate腫瘤/抗原112抗體包裝100ml
茶堿(標準品)英文名稱: Quinine hemisulfate salt hydrate微管動力調(diào)節(jié)蛋白FAM82A抗體包裝25ml
柴胡(北柴胡)(標準品)英文名稱: Sodium phosphate, dibasic, dodecahydrateFAM50B蛋白抗體包裝500ml
柴胡皂苷A(標準品)英文名稱: Sodium phosphotungstate, hydrate形成2抗體(成蛋白)包裝100g
柴胡皂苷B1(標準品)英文名稱: Sodium stearate脂閥結(jié)構(gòu)蛋白1抗體包裝25g
柴胡皂苷B2(標準品)英文名稱: Sodium thiosulfate anhydrous成纖維生長因子17抗體包裝1g
柴胡皂苷B3(標準品)英文名稱: Sulfo NHS LC Biotin成纖維生長因子23抗體包裝5g
柴胡皂苷B4英文名稱: Sulfo NHS SS Biotin成纖維生長因子20抗體包裝1g
柴胡皂苷C(標準品)英文名稱: Tetraacetylribose成纖維生長因子19抗體包裝5g
柴胡皂苷D(標準品)英文名稱: Tyrosine decarboxylase成纖維生長因子22抗體包裝25g
柴胡皂苷F(標準品)英文名稱: Victoria blue R胎球蛋白A包裝5g
柴胡皂苷G(標準品)英文名稱: α-Ketoglutaric acid potassium salt叉頭蛋白L2抗體包裝25g
柴胡皂苷H(標準品)英文名稱: 1,1-Cyclohexanediacetic acid monoamide叉頭相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子3抗體包裝5g
柴胡皂苷I英文名稱: 1,2-Ethanedithiol鐵蛋白抗體包裝1g
深黃被孢霉Mortierella│isabellina 質(zhì)量規(guī)格:≥60U/mg,USP,BR,可用于培養(yǎng)生長激釋放多肽試劑盒7-羥基千金子二萜;7β-Hydrox
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis Berliner 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR生長激結(jié)合蛋白試劑盒芹糖異甘草苷;Isoliquiritin
華癸中間根瘤菌Mesorhizobium│huakuii 質(zhì)量規(guī)格:含量測定生長激試劑盒5-羥色;Serotonin hydr
11β-Hydroxysteroid dehydrogenase抑制劑性核蛋白1/鋅指蛋白basonuclin抗體白細胞介1α(IL-1α/IL-1F1)檢測試劑盒IL-1α/IL-1F1 ELISA Kit
癌膜蛋白11抗體(前梯度同源蛋白2)白細胞介1α(IL-1α)檢測試劑盒IL-1α ELISA Kit
人腦鈉單克抗體白細胞介17(IL-17)檢測試劑盒IL-17 ELISA Kit
B淋巴成熟因子抗體白細胞介16(IL-16)檢測試劑盒IL-16 ELISA Kit
促凋亡Bik蛋白抗體白細胞介13(IL-13)檢測試劑盒IL-13 ELISA Kit
癌抑癌蛋白抗體白細胞介12(IL-12/P70)檢測試劑盒IL-12/P70 ELISA Kit
癌易感因環(huán)狀結(jié)構(gòu)域蛋白抗體白細胞介12(IL-12/P40)檢測試劑盒IL-12/P40 ELISA Kit
癌相關(guān)抗原BRCAA1抗體白細胞介10(IL-10)檢測試劑盒IL-10 ELISA Kit
腦組織表達X連鎖蛋白1抗體白細胞分化抗原配體40(CD40/TNFRSF5)檢測試劑盒CD40/TNFRSF5 ELISA Kit