產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Lp-PLA2抑制劑(Darapladib)
英文名稱:Darapladib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Darapladib是一種有效的脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)抑制劑,IC50為0.25nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):356057-34-6 別名:SB-480848 純度:99.80% 分子量:666.77 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
WAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)ELISA Kit英文名稱:WFDC1 ELISA Kit磷化皮層肌動(dòng)蛋白抗體包裝25g
V-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病毒癌基因同源物B(RELB)ELISA Kit英文名稱:RELB ELISA Kit磷化周期B1抗體包裝500g
V-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)ELISA Kit英文名稱:RELA ELISA Kit磷化周期B1抗體包裝1g
V-Myc骨髓細(xì)胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)ELISA Kit英文名稱:MYC ELISA Kit磷化cyclin D1抗體包裝5g
V-Jun肉瘤病毒癌基因同源物(JUN)ELISA Kit英文名稱:JUN ELISA KitCD13肽N抗體包裝1g
VI型膠原(COL6)ELISA Kit英文名稱:COL6 ELISA Kit巨噬炎性蛋白MIP-3a抗體包裝250mg
VGF神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白(VGF)ELISA Kit英文名稱:VGF ELISA Kit間隙連接蛋白32抗體包裝25g
V-Fos-FBJ骨肉瘤病毒癌基因同源物(FOS)ELISA Kit英文名稱:FOS ELISA KitC端結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
V-Ets骨髓成紅細(xì)胞增多癥病毒E26癌基因同源物1(ETS1)ELISA Kit英文名稱:ETS1 ELISA Kit高分子量角蛋白抗體包裝100ml
V-ErbB2紅白血病病毒癌基因同源物3(ErbB3)ELISA Kit英文名稱:ErbB3 ELISA Kit22號(hào)染色體開放閱讀框39抗體包裝25ml
VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)ELISA Kit英文名稱:VCC1 ELISA Kit周期G抗體包裝25g
UDP葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移(UGCG)ELISA Kit英文名稱:UGCG ELISA KitCrk p38抗體包裝5g
T-型電壓依賴鈣離子通道α1H亞基(CACNα1H)ELISA Kit英文名稱:CACNα1H ELISA Kit磷化Crk p38抗體包裝1g
T-細(xì)胞激活連接蛋白(LAT)ELISA Kit英文名稱:LAT ELISA Kit核心結(jié)合因子α1抗體(成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子)Cbfα1包裝5g
Toll樣受體9(TLR9)ELISA Kit英文名稱:TLR9 ELISA Kit膽囊收縮8抗體包裝10MG
大奇異球菌Deinococcus│grandis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR異質(zhì)性胞核核糖核蛋白C試劑盒洋艾;Absinthin
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A3試劑盒α-亞麻;alpha-Linoleni
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A2/B1試劑盒乙龍腦酯;Bornyl acetate
Lp-PLA2抑制劑(Darapladib)脫羧蛋白體36 cxorf36抗原L-細(xì)辛脂(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
(DTX1) (Deltex protein 1)抗原levatinHuman
DISC1 N端抗原Lup-20(29)-en-28-oic acid, ...Human, Mouse
DISC1 C端抗原Monnieriside GHuman, Mouse, Rat
DR3 死亡受體(抗原)MulticaulisinHuman, Mouse
人瘤病16型E7蛋白抗原N-阿魏酰真蛸Human, Mouse
表皮生長因子受體(抗原)N-芐-(9Z,12Z)-十八碳二烯酰Human, Mouse
天冬蛋白家族蛋白(水稻蛋白的一種)(抗原)N-芐-(9Z,12Z,15Z)-十八碳三烯酰Human, Mouse
一種新型的胰島因子(抗原)N-芐十六烷酰Human, Rat
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)