商品介紹:
Flumatinib(HH-GV-678)甲磺酸鹽是imatinib的衍生物,為多種激酶抑制劑,對c-Abl,PDGFRβ和c-Kit的IC50為1.2nM,307.6nM和2662nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:895519-91-2 純度:99.90% 分子量:658.69 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:多種激酶抑制劑(Flumatinib mesylate)
英文名稱:Flumatinib mesylate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
石榴干腐菌Candida kefyr
大腸埃希菌Candida vilida
球孢白僵菌Rhodotorula glutinis
柳府皮殼菌Saccharomyces cerevisiae
*蜜環(huán)菌Cryptococcus laurentii
就地堆肥地芽孢桿菌Saccharomyces willianus
球孢白僵菌Candida utilis
總狀毛霉原變型Saccharomyces cheralieri
黃隱球酵母Candida utilis
釀酒酵母Saccharomyces cerevisiae
豬瘟陰、陽性血清國家參考品Rhodotorula rubra
喜堿兩面神菌Saccharomyces logos
產(chǎn)棒桿菌Saccharomyces cerevisiae
瓜笄霉Zygosaccharomyces rouxii
百日咳鮑特菌(可訂)Kloeckera apiculata
米曲霉Debaryomyces hansenii
小鼠促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)免疫試劑盒磷化癌易感基因1抗體人抗心肌抗體(AMA)氫高烏甲
小鼠促卵泡(FSH)免疫試劑盒磷化β分泌抗體人抗心肌抗體(AMA)氫加蘭他敏
小鼠促甲狀腺釋放激(TRH)免疫試劑盒磷化相關(guān)死亡促進因子抗體人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)氫山莨菪堿
小鼠促甲狀腺(TSH)免疫試劑盒磷化相關(guān)死亡促進因子抗體人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)氫樟柳堿
多種激酶抑制劑(Flumatinib mesylate)SDF4 英文名稱: 基質(zhì)細胞衍生因子4抗體(鈣結(jié)合蛋白) 0.2ml
EFHC1 英文名稱: EFHC1蛋白抗體 0.2ml
兔抗大鼠sIgA抗體 Anti-Rat IgA 0.2ml
Anti-TNF- Alpha /Biotin 生物素標記 壞死因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MK3(Thr222) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶3抗體 規(guī)格 0.1ml
Isulin 胰島素(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg