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詳細介紹
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1371 |
商品介紹：
名稱 大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質細胞 2.組織來源：脊髓組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質細胞分離自脊髓組織；脊髓是細細的管束狀的神經(jīng)結構，位于脊柱的椎管內且被脊椎保護；是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細胞依靠復雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對的神經(jīng)，分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H形（蝴蝶型）灰質區(qū)，主要由神經(jīng)細胞構成；在灰質區(qū)周圍為白質區(qū)，主要由有髓神經(jīng)纖維組成；脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)（稱為脊神經(jīng)）分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路，也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應的31節(jié)，31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)膠質細胞，簡稱膠質細胞，是神經(jīng)組織中除神經(jīng)元以外的另一大類細胞，也有突起，但無樹突和軸突之分，廣泛分布于中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)。在哺乳類動物中，神經(jīng)膠質細胞與神經(jīng)元的細胞數(shù)量比例約為10：1。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）中的神經(jīng)膠質細胞主要有星形膠質細胞、少突膠質細胞（與前者合稱為大膠質細胞）和小膠質細胞等。傳統(tǒng)認為膠質細胞屬于結締組織，其作用僅是連接和支持各種神經(jīng)成分，其實神經(jīng)膠質還起著分配營養(yǎng)物質、參與修復和吞噬的作用，在形態(tài)、化學特征和胚胎起源上都不同于普通結締組織。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質細胞采用膠原酶-胰酶聯(lián)合消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結合化學試劑抑制法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質細胞經(jīng)GC（Galactocerebroside）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R238 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性不增殖；不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 CD157 / BST1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD157 / BST1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD79B / B29 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 KIT / c-KIT 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD68 / Macrosialin 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD34 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 XEDAR / EDA2R 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質細胞Saccharomyces cerevisiae雙氫睪酮檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae水通道蛋白1檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae水通道蛋白2檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae水通道蛋白3檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae水通道蛋白4檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae水通道蛋白5檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae死亡受體5檢測試劑盒
Saccharomyces sp.四氫生物蝶呤檢測試劑盒
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