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TM3 (小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞)

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更新時間:2022-04-06 12:02:47瀏覽次數(shù):381

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0233 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
TM3 (小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞)的相關(guān)*:SiRNA大量SperfusinX脂質(zhì)體腹腔法動物轉(zhuǎn)染試劑盒 5次
SiRNA大量SperfusinX脂質(zhì)體局灶法動物轉(zhuǎn)染試劑盒 5次
動物細(xì)胞β-半乳糖苷活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒 20次
β-半乳糖苷標(biāo)準(zhǔn)曲線化學(xué)發(fā)光法測定試劑盒 20次
動物組織β-半乳糖苷活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒 20次
細(xì)胞β-半乳糖苷原位染色試劑盒 100次

詳細(xì)介紹

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品屬性:  

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

TM3 (小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞)

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0233

商品介紹:

名稱    TM3 (小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞)  

別稱TM-3

種屬小鼠

年齡(性別)雄性,11-13

組織來源睪丸間質(zhì)

生長特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述TM3細(xì)胞在LH作用下cAMP產(chǎn)量升高,但對促卵泡激素沒有響應(yīng)。TM3細(xì)胞對LH的響應(yīng)持續(xù)時間與血清批次有關(guān);在LH存在下,TM3細(xì)胞可以代謝膽固醇。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基DMEM/F125% HS2.5% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37℃

致瘤性No, The cells were not tumorigenic in immunosuppressed mice, but did form colonies in semisolid medium.

受體表達(dá)情況luteinizing hormone (LH); epidermal growth factor (EGF); androgen receptor, positive; e種屬ogen receptor, positive; progesterone receptor, positive

基因表達(dá)情況prostaglandin F2a

注意事項該細(xì)胞貼壁松散,操作時請盡量輕柔;換液時需預(yù)熱培養(yǎng)基;收貨如有大塊脫落的細(xì)胞團,為正?,F(xiàn)象,請按照收貨注意事項處理。

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

牛窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

β-轉(zhuǎn)導(dǎo)素重復(fù)序列包含蛋白(BTRC)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

蛋白體(prosome,macropain)亞基,β型,1(PSMB1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

犬胰島素樣因子3(INSL3)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

CXC趨化因子受體7(CXCR7)免疫試劑盒*直銷

低密度脂蛋白(LDL)免疫試劑盒*直銷

馬皮質(zhì)酮(CORT)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

總蛋白S(TPS)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

小鼠RAR的相關(guān)孤獨受體C(RORC)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

TM3 (小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞)2 ug pCMV-SPORT6 SNAP25 pCMV-SPORT6 SNAP25 低溫運輸,-20℃保存

波爾頓選擇性肉湯 Bolton Broth 250g

2 ug pN3 pN3 低溫運輸,-20℃保存

50T 溶血性鏈球菌ACR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

1 g L-Citrulline(NO中間體) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

25mL E.coli Sample Buffer  E.coli Sample Buffer  常溫保存

100mL BLOTTO溶液 BLOTTO Solution -4℃保存(不能保存在-20℃)

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