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mIHC在結直腸癌轉移機制方面的應用分享：
 

免疫選擇條件下腫瘤轉移的時空演化——作者運用縱向數據對比研究了免疫微環(huán)境如何影響結直腸癌在不同轉移器官中的腫瘤演化。通過多重分析，作者還發(fā)現轉移過程中的克隆進化模式取決于轉移部位的免疫環(huán)境。 
文章展示了多重熒光免疫組化技術的多種應用和數據分析策略，今天我們就來詳細解讀一下。 

文章利用了多指標和多分析策略來對免疫逃逸機制進行分析，建立了腫瘤轉移的免疫評價體系。尤其是作者對Ki67+腫瘤細胞和CD3+細胞之間的空間鄰近性分析，使得我們可以觀察到新抗原缺失的新的遺傳證據。同時還揭示了復發(fā)風險與免疫得分、免疫編輯和腫瘤負荷之間的關系。 

兩例大腸癌患者P210和P45的生物標本收集點解剖圖。從轉移灶M8（a和b，P45）切出兩個連續(xù)的玻片。多區(qū)域切除標本取自M07的一個大的腫瘤組織（M07n）及其周圍的腫瘤組織，以及P210患者的一個巨大的轉移瘤，M10（四個位置b1–4，尺寸25 mm）。 

作者用三個指標來量化免疫浸潤：全玻片免疫細胞密度（WS）、三個浸潤密度比較高的區(qū)域即熱點密度（HSs），腫瘤中心（CT）CD3+/CD8+T細胞密度及其浸潤邊緣（IM）的免疫得分。作者運用一組7指標（單張4指標5色）的多重熒光免疫組化片子繪制了腫瘤微環(huán)境中免疫細胞的空間分布圖。 

腫瘤微環(huán)境中T細胞（橙色）和增殖性腫瘤細胞（藍色，CK+Ki67+）的空間分布模式圖。——兩點之間的連接表示近距離細胞。LoNo、HiNo和HiYes三組的分布圖顯示T細胞和腫瘤細胞的短距離在減少。Pies圖顯示了在CT觀察到的增殖性（頂部）和非增殖性腫瘤細胞（底部）旁邊的CD3 T細胞百分比，無論是增殖性還是非增殖性腫瘤細胞附近，T細胞都在增多。星號則強調了樣本組之間在比例上的顯著差異。 
多重熒光免疫組化圖提供了很好的空間定位佐證。 

多重熒光免疫組化文獻解讀——總結

基于以上研究成果，作者提出了一個解釋腫瘤轉移進展的平行選擇模型，其中分支可以追溯到免疫逃逸克隆。這一發(fā)現有助于提高我們對腫瘤擴散的認識和免疫治療學的發(fā)展。

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