支原體是一種大小僅為0.2~0.3 um,無(wú)細(xì)胞壁,可透過(guò)一般過(guò)濾膜(0.22-0.45 um)的原核生物,在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,是細(xì)胞培養(yǎng)中令人頭疼的大問(wèn)題。支原體污染可能來(lái)自培養(yǎng)基、血清或?qū)嶒?yàn)操作者,會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)率、細(xì)胞形態(tài)、基因表達(dá)、細(xì)胞代謝和細(xì)胞活力。支原體感染不易察覺(jué),因此對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞定期進(jìn)行支原體檢測(cè)就非常重要。
那如何確定細(xì)胞是被支原體污染呢?
1、細(xì)胞形態(tài)改變
支原體污染比較嚴(yán)重時(shí)可出現(xiàn)生長(zhǎng)減慢,有的培養(yǎng)基pH明顯變酸,并出現(xiàn)細(xì)胞病變,以此可依次對(duì)支原體污染進(jìn)行檢測(cè),但有些情況下支原體污染引起的病變特征與病毒感染相似,因此不能準(zhǔn)確診斷。
2. 試劑盒檢測(cè)法:
愛必信支原體染色檢測(cè)試劑盒可用于在培養(yǎng)細(xì)胞中對(duì)支原體或其它原核生物進(jìn)行原位染色檢測(cè)。主要用于檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞中是否存在支原體污染。
培養(yǎng)細(xì)胞中的細(xì)菌污染、酵母污染或霉菌污染都在光學(xué)顯微鏡下可見,但支原體污染在光學(xué)顯微鏡下不可見,必須通過(guò)特定的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)。
檢測(cè)支原體污染的方法有很多種,包括支原體分離培養(yǎng)、支原體特異酶檢測(cè)、RT-PCR檢測(cè)以及DNA熒光染色檢測(cè)。該試劑盒是通過(guò)Hoechst染色來(lái)檢測(cè)支原體,可快速、有效、高靈敏度地檢測(cè)支原體污染。
如果發(fā)現(xiàn)有支原體污染,建議更換無(wú)污染的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。該試劑盒如用于六孔板樣品檢測(cè),至少可以檢測(cè)100個(gè)樣品。
3 細(xì)胞間隙存在不動(dòng)小黑點(diǎn)
如何預(yù)防支原體感染?
定期檢測(cè):支原體感染會(huì)使培養(yǎng)細(xì)胞慢慢枯萎,因此對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞定期進(jìn)行支原體檢測(cè)非常重要。一般來(lái)說(shuō)每1至3個(gè)月就應(yīng)該進(jìn)行一次支原體檢測(cè)。將定期支原體檢測(cè)常規(guī)化堅(jiān)持下去,是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)支原體感染的關(guān)鍵。使用愛必信支原體預(yù)防劑,可以有效的排除血清、培養(yǎng)基中可能存在的支原體,非抗生素類:多肽類,無(wú)耐藥性,無(wú)二次污染:隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),會(huì)被緩慢降解為氨基酸,可用于大規(guī)模發(fā)酵、細(xì)胞治療等領(lǐng)域,且細(xì)胞毒性小,已在多種細(xì)胞上進(jìn)行過(guò)驗(yàn)證。可以放心使用
如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞已經(jīng)感染,如何清除支原體感染?
使用愛必信支原體清除試劑可以有效抑制和清除在培養(yǎng)細(xì)胞中廣泛存在的支原體污染。一方面可以用于消除細(xì)胞中已有的支原體污染,也可以用于防止支原體污染。 本試劑是一種篩選獲得的天然抗生素,抑制或清除支原體時(shí)的濃度比較低,對(duì)細(xì)胞沒(méi)有毒性。和細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)所常用的青霉素和鏈霉素那樣,對(duì)細(xì)胞的各種檢測(cè)沒(méi)有干擾??梢杂行б种撇⑶宄龑?shí)驗(yàn)室常見支原體,包括 Mycoplasma orale, M. arginini, M. hyorhinis和Acholeplasma laidlawii。通常在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入本試劑約一周即可有效抑制或清除支原體。
相關(guān)產(chǎn)品:
名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
支原體染色檢測(cè)試劑盒 | abs9252 | 100T |
支原體清除劑 | abs9375 | 200ul; 200uL×5 |
支原體預(yù)防劑 | abs9376 | 500ul; 500uL×4 |
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