Q:步驟上的可選步驟能否省略?
A:該試劑盒是經(jīng)過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的,再進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的時(shí)候?qū)嶒?yàn)室都是要做這個(gè)可選步驟的,建議不要省略,按照說明書操作。
Q:protein A和protein G beads怎么選?
A:各5ul就可以了
Q:超聲破碎冰上操作是必須的嗎?4℃條件能否微調(diào)?
A:建議冰上操作,4℃是可以微調(diào)的。
Q:beads出現(xiàn)吸不出來的情況,怎么處理?
A:吸之前需注意槍頭要剪一下再吸,如若beads吸不上來,可加入等體積的20%乙醇混勻后再吸。
Q:如果沒有超聲破碎儀的話,能不能用酶解的辦法破碎細(xì)胞?
A:酶解和超聲都是可以的,酶的濃度按照正常實(shí)驗(yàn)室使用濃度就可以。
Q:實(shí)驗(yàn)的時(shí)候能抗體beads一起加嗎?還是先加抗體再加beads?
A:都可以,建議參考說明書使用,先加抗體再加beads。
Q:washing buffer一定要使用配套的嗎?
A:zui終濃度是稀釋的1*的washing buffer都可以。
Q:怎么看出現(xiàn)的條帶結(jié)果?
A:比較關(guān)注的就是三個(gè)泳道,input和IgG以及檢測(cè)互相作用的泳道,理論上input有一條目的條帶,IgG沒有條帶。如果input沒有條帶,說明在進(jìn)行免疫共沉淀之前沒有進(jìn)行WB驗(yàn)證,建議先驗(yàn)證之后再?gòu)念^做。IgG陰性對(duì)照出現(xiàn)條帶的話是不正常的,應(yīng)該是受重鏈和輕鏈的影響,說明使用的二抗不正確,建議更換特異性更強(qiáng)的二抗。
Q:免疫共沉淀試劑盒裂解液能用于組織嗎?比例又是如何?
A:可以的,不過要事先將組織研磨成勻漿,比例和細(xì)胞比例一致。
愛必信免疫(共)沉淀(IP/CoIP)試劑盒:
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
abs955 | 免疫(共)沉淀(IP/CoIP)試劑盒 | 50tests |
愛必信特色產(chǎn)品線(全部現(xiàn)貨):
二抗、標(biāo)簽抗體、對(duì)照抗體;WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;細(xì)胞因子、信號(hào)通路調(diào)節(jié)劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒、呼吸爆發(fā)試劑盒;動(dòng)植物提取物...
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