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標(biāo)簽抗體知多少

閱讀:3862      發(fā)布時間:2018-2-5
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標(biāo)簽抗體,別名為抗原表位,又稱抗原決定簇,是抗原分子中決定抗原特異性的特殊區(qū)域或基團(tuán),是與抗體特異性結(jié)合的結(jié)構(gòu)或序列。隨著生物技術(shù)的發(fā)展,科研人員可以通過DNA重組技術(shù),構(gòu)建包含目的基因以及表位標(biāo)記的融合蛋白,進(jìn)而通過特異性標(biāo)簽抗體對其鑒定與純化,以達(dá)到研究的需求。常用的標(biāo)簽包括myc、HA、Flag、His、GST等。

1. Flag標(biāo)簽—抗Flag標(biāo)簽抗體

Flag標(biāo)簽系統(tǒng)是利用一個短的親水性八氨基酸肽(DYKDDDDK)融合到目標(biāo)蛋白。Flag標(biāo)簽可位于蛋白質(zhì)的C端或N端,該系統(tǒng)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類型,包括細(xì)菌、酵母和哺乳動物細(xì)胞等,相應(yīng)的Flag標(biāo)簽抗體也被廣泛應(yīng)用。由于Flag標(biāo)簽系統(tǒng)的純化條件是非變性的,因此可以純化所有有活性的融合蛋白。Flag標(biāo)簽可以通過加入腸激酶處理去除,腸激酶專一識別該肽序列C末端的5個氨基酸殘基。Flag抗體可以用于檢測和Flag標(biāo)簽融合表達(dá)蛋白的表達(dá)、定位,以及純化、定性或定量檢測Flag融合表達(dá)蛋白等。

2. His標(biāo)簽—抗His標(biāo)簽抗體

His標(biāo)簽是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設(shè)計用于重組蛋白質(zhì)的吸附純化。由于分子量較小,并且較容易分離和純化,His融合標(biāo)簽與其他標(biāo)簽相比有很多明顯優(yōu)勢,是目前用于純化的融合標(biāo)簽中使用的一種。利用 His標(biāo)簽可以建立一個基于融合蛋白的檢測和純化系統(tǒng)。His抗體可以用于檢測和His標(biāo)簽融合表達(dá)蛋白的表達(dá)、定位,以及純化、定性或定量檢測His融合表達(dá)蛋白等。

3. GST標(biāo)簽—抗GST標(biāo)簽抗體

GST標(biāo)簽體系具有蛋白表達(dá)產(chǎn)率高、表達(dá)產(chǎn)物純化方便,以及利于GST抗體制備等特點。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可從細(xì)菌裂解液中提取,在不變性的條件下通過親和層析得到。GST融合蛋白可被位點特異性蛋白酶裂解,從而除去GST蛋白。融合蛋白又是一個非常好的強(qiáng)免疫原,因此,很容易制備抗新蛋白的抗體。正是由于以上的優(yōu)點,商品化的GST融合蛋白表達(dá)體系以及GST標(biāo)簽抗體系統(tǒng)至今仍被廣泛應(yīng)用。近年來在原核表達(dá)體系中,谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶GST表達(dá)純化系統(tǒng)的應(yīng)用更為普遍。

4. Myc標(biāo)簽—抗Myc標(biāo)簽抗體

Myc標(biāo)簽(序列為:EQKLISEEDL)在WB雜交技術(shù)、免疫沉淀IP和流式細(xì)胞術(shù)中均得到成功運(yùn)用,可用于檢測重組蛋白在細(xì)菌、酵母、昆蟲細(xì)胞和哺乳細(xì)胞中的表達(dá)情況。Myc重組蛋白質(zhì)可通過偶聯(lián)Myc標(biāo)簽抗體到活化的瓊脂糖上而進(jìn)行親和純化。Myc標(biāo)簽可放在C端或N端,但Myc重組蛋白的低pH洗脫條件往往會降低蛋白質(zhì)的活力,因此Myc標(biāo)簽系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于檢測但很少用于純化。

5. HA標(biāo)簽—抗HA標(biāo)簽抗體

HA標(biāo)簽來源于人類流感血凝素的98-106位氨基酸,利用一個HA (influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽融合到目標(biāo)蛋白。HA標(biāo)簽具很強(qiáng)的免疫反應(yīng)性,被廣泛用于HA融合目的蛋白的分離、純化、檢測和示蹤。重組的HA標(biāo)簽蛋白可以使用偶聯(lián)有HA高特異性單克隆抗體的樹脂來完成純化。HA標(biāo)簽系統(tǒng)HA標(biāo)簽可位于蛋白質(zhì)的C端或N端,該系統(tǒng)已廣泛應(yīng)用于多種細(xì)胞類型,相應(yīng)的HA標(biāo)簽抗體也被廣泛應(yīng)用,HA標(biāo)簽抗體能特異識別C末端或N末端帶有HA標(biāo)簽(HA-tagged)的融合蛋白。

6. GFP標(biāo)簽抗GFP標(biāo)簽抗體

綠色螢光蛋白(Green Fluorescent Protein),簡稱GFP,在藍(lán)色波長范圍的光線激發(fā)下會發(fā)出綠色螢光。GFP或其突變體EGFP等被廣泛用于基因表達(dá)效率的檢測,以及和目的蛋白融合表達(dá)用于檢測目的蛋白的表達(dá)和分布。一般來說,GFP抗體不僅可以檢測GFP或其適當(dāng)?shù)耐蛔凅w,也可以檢測和GFP或其適當(dāng)?shù)耐蛔凅w融合表達(dá)蛋白的表達(dá)、定位,以及純化、定性或定量檢測GFP融合表達(dá)蛋白等。

愛必信熱賣標(biāo)簽抗體訂購信息:

  貨號  產(chǎn)品名稱  應(yīng)用  規(guī)格
  abs830005 Anti- DYKDDDDK (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody)  WB,IP  50ul,100ul
  abs830020 Anti- DYKDDDDK (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) Affinity Gel

  Purification, IP

  1ml
  abs830014 Anti- DYKDDDDK (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody)(HRP)  WB  50ul
  abs830010  Anti- GST (HRP) 抗體  WB  50ul
  abs830001  Anti- GST 抗體  WB,IP  50ul/100ul
  abs830015  Anti- HA (HRP) 抗體  WB  50ul
  abs830021  Anti- HA Affinity Gel  Purification, IP  1ml
  abs830006  Anti- HA 抗體  WB,IP  50ul/100ul
  abs830011  Anti- His Tag (HRP) 抗體  WB  50ul
  abs830022  Anti- His Tag Affinity Gel  rProtein
  Purification, IP
  1ml
  abs830002  Anti- His Tag抗體  WB,IP  50ul/100ul
  abs830012  Anti- His(C-terminal Specific) (HRP) 抗體  WB  50ul
  abs830003  Anti- His(C-terminal Specific) 抗體  WB,IP  50ul/100ul
  abs830013  Anti- Myc (HRP) 抗體  WB  50ul
  abs830023  Anti- Myc Affinity Gel  Purification, IP1ml

 

愛必信特色產(chǎn)品線(全部現(xiàn)貨):

二抗、標(biāo)簽抗體、對照抗體;WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;細(xì)胞因子、信號通路調(diào)節(jié)劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒、呼吸爆發(fā)試劑盒;動植物提取物...

 

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