濟(jì)南九望紫外可見近紅外分光光度計(jì)

1、基本工作原理

1）吸收的本質(zhì)：分光光度法是利用物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)光的選擇吸收特性而建立起

來的分析方法。通常利用棱鏡或光柵分光來取得單色光，使單色光連續(xù)地依次通

過溶液，并測(cè)得該溶液對(duì)每一波長(zhǎng)的吸收，得到吸收光譜曲線。

 吸收光譜來源于物質(zhì)對(duì)光的選擇吸收，這是物質(zhì)的宏觀現(xiàn)象，而吸收的本質(zhì)

是分子內(nèi)部運(yùn)動(dòng)和光相互作用的結(jié)果。當(dāng)物質(zhì)的分子吸收一定能量或波長(zhǎng)的光譜

后，透過的光譜中有些波長(zhǎng)被吸收就形成了吸收光譜。吸收的能量愈小，則相應(yīng)

的光的波長(zhǎng)，吸收峰出現(xiàn)在較長(zhǎng)波段。當(dāng)吸收在紅外區(qū)時(shí)形成紅外吸收光譜，如

果吸收能量愈大，則相應(yīng)的波長(zhǎng)愈短，吸收峰出現(xiàn)在較短波段，當(dāng)吸收在紫外區(qū)

產(chǎn)生紫外吸收光譜。

2）吸收定律—朗伯比耳定律：當(dāng)一束平行單色光通過均勻的溶液時(shí)，其吸光度

與溶液的濃度和厚度的乘積成正比。

其數(shù)字表達(dá)式：A=KCL=LogI0/I=-LogT

吸收定律數(shù)字表達(dá)式成立的前提：①，入射光為單色光，②，吸收過程中各

物質(zhì)無相互作用，各物質(zhì)吸光度具有加和性，③，光與物質(zhì)的作用*于吸收過

程，沒有熒光散射和光化學(xué)現(xiàn)象，④，吸收物是一種均勻分布的連續(xù)體系，

3）影響分光光度法的原因：

a，輻射與物質(zhì)的非吸收作用引起的誤差，

b，熒光與光化學(xué)反應(yīng)的影響，一般說來，熒光對(duì)分光光度測(cè)量產(chǎn)生的誤差

可以忽略，多數(shù)情況下顯色體系的熒光效率很小，而且熒光發(fā)射是各向同性，只

有一小部分沿著透射光方向進(jìn)入檢測(cè)器，使測(cè)量吸光度偏低，產(chǎn)生負(fù)偏離。熒光

 對(duì)吸收測(cè)量的影響*程度上決定于儀器的吸收池和檢測(cè)器光學(xué)設(shè)計(jì)，

 c，反射和散射，吸收定律只適用于均勻介質(zhì)的吸收體系，渾濁溶液因散射

使實(shí)測(cè)吸光度增加，導(dǎo)致偏離比耳定律，

d，儀器的非理想性引起的誤差，

 e，復(fù)色光對(duì)比耳定律的偏離，大多數(shù)光度計(jì)只能獲得接近于單色光的狹窄

的光通帶，實(shí)際上仍是有復(fù)色光性質(zhì)，可導(dǎo)致偏離比耳定律。偏離的大小取決于

二單色光的摩爾吸光系數(shù)差△ε，|△ε|很小時(shí)，可近似認(rèn)為是單色光，在低濃

度時(shí)，工作曲線仍為直線，但濃度較大時(shí)，隨濃度增大，A-C曲線彎曲愈嚴(yán)重，

故比耳定律只適用于稀溶液，

f 雜散光，雜散光是指進(jìn)入檢測(cè)器的處于待測(cè)波長(zhǎng)光譜帶寬范圍外的不需要

的其它波長(zhǎng)組分。其主要來源于分光光度計(jì)色散元件棱鏡或光柵、反射鏡、透鏡

表面的散射，單色器內(nèi)壁灰塵及其它元件傷痕的反射和漫射等，雜散光可引起嚴(yán)

重的測(cè)量誤差。在儀器能量處于小的波長(zhǎng)處，雜散光通常處于大值（如氘燈

220nm,鎢燈 340nm），

g，狹縫寬度，狹縫寬度不僅影響光譜的純度，也影響吸光度值。在定量分

析時(shí)，為了得到足夠的測(cè)量信號(hào)，應(yīng)采用較大的狹縫，在定性分析時(shí)則采用較小

的狹縫，當(dāng)出射狹縫和入射狹縫的寬度相等時(shí)，狹縫寬度引起的誤差小，

- 1 -

 h，波長(zhǎng)標(biāo)度尺的誤差，波長(zhǎng)標(biāo)度尺即儀器的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度，如誤差較大或未

作校正，將光譜測(cè)量產(chǎn)生誤差，即影響吸光度測(cè)量的準(zhǔn)確度（在吸收光譜的尖峰

處更為顯著），

 i，不平行入射光的影響，比耳定律的前提條件之一是采用平行入射光束，

以保證全部光束通過同一厚度的吸收介質(zhì)，當(dāng)入射光束偏離平行性較大時(shí)，就明

顯導(dǎo)致偏離比耳定律。如果儀器中光束中等強(qiáng)度偏離平行性，引起的吸光度測(cè)量

誤差一般在 0.5%以內(nèi)；

j，光度標(biāo)尺的誤差，光度標(biāo)尺即透射比準(zhǔn)確度，其誤差大小直接影響光度

測(cè)量的準(zhǔn)確度。

濟(jì)南九望紫外可見近紅外分光光度計(jì)