RCBBF*冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→（-20℃30分鐘*）→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。

RCBBF*操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
資源名稱 RCBBF*
種屬  兔角膜后基質(zhì)層成纖維細胞

形態(tài)  成纖維樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基  F12:Ham'sF12NutrientMixture5%FBS

傳代方法  1:3~1:6傳代；2~3天1次。

生長特性  貼壁生長

存儲條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

詳細說明

傳代情況  P5

支原體檢測  培養(yǎng)法（-）

使用權(quán)限  A類

描述  北京眼科研究所建系細胞。

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。

RCBBF*注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
ASGR1 Others Human 人 ASGPR1 / ASGR1 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)

CL-0159MLTC-1(小鼠間質(zhì)細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2

小鼠肝實質(zhì)細胞*培養(yǎng)基 100mL

CT26.WT小鼠結(jié)腸癌細胞 CT26.WT mouse colon cancer cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS

LIF Protein Human 重組人 LIF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RKO-AS45-1(人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞) 5×106cells/瓶×2 6T-CEM(T細胞白血病)

CL-0159MLTC-1(小鼠間質(zhì)細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2

ASGR1 Others Human 人 ASGPR1 / ASGR1 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)

小鼠肝實質(zhì)細胞*培養(yǎng)基 100mL

CT26.WT小鼠結(jié)腸癌細胞 CT26.WT mouse colon cancer cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS

LIF Protein Human 重組人 LIF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

RKO-AS45-1(人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞) 5×106cells/瓶×2 6T-CEM(T細胞白血病)

EFNA5 Others Human 人 EphrinA5 人細胞裂解 (陽性對照) (變性)

原代滑膜皮細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml

MAP2K2 Others Human 人 MEK2 / MAP2K2 / MKK2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解 (陽性對照) (變性)

Neuro-2A細胞，腦神經(jīng)瘤細胞 人肝癌細胞,HepG2.2.1.5細胞 CM-M130小鼠肝外膽管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

黃胸鼠肺成纖維細胞;YCR

敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21

Hela, 人癌細胞系

HNE2, 人鼻咽癌細胞系

SKOV3 [SK-OV-3], 人癌腺癌細胞系

786-O [786-0], 人透明腺癌細胞

大鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)素1(NRG1)ELISA試劑盒 ，英文名： NRG1 ELISA Kit

Chicken virus enteritis (DEV) ELISA Kit 雞病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA試劑盒

Ratlymphocytefunctionassociatedantigen3,LFA-3ELISAKit 大鼠淋巴細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

96HBeAb(立可讀)乙型肝炎e抗體9696

細胞半胱氨酸蛋白酶-1(CASPASE-1)活性比色法定量檢測試劑盒20次

Ratβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISAKit大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Mouseanti-IVIgGantibodyELISAKit小鼠抗IVIgG抗體ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠銅藍蛋白(CP/CER)ELISA檢測試劑盒MouseCeruloplasmin,CP/CERELISAKit 96T/48T

人抗腎小管基底膜抗體(TBM)免疫試劑盒 Human tubular basement membrane antibogy,TBM ELISA Kit

RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

細胞PAR-2蛋白表達熒光定量檢測試劑盒10/50次

Humantransforminggrowthfactorα,TGF-αELISA試劑盒人轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

人血管生成素1(ANG-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

豬髓過氧化物酶(MPO)免疫試劑盒 Pig Myeloperoxidase,MPO ELISA kit

HumanCXC-chemokineligand16,CXCL16ELISAKit 人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanLysozyme,LZMELISA試劑盒人溶菌酶(LZM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織纖維二糖酶(cellobiase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

HumanHepatitisCvirusIgM，HCV-IgMELISAKit人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

RCBBF*人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白elisa試劑盒   人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒、人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人轉(zhuǎn)化生長因子β2elisa試劑盒   人轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒、人轉(zhuǎn)化生長因子β2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人轉(zhuǎn)化生長因子β1elisa試劑盒   人轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒、人轉(zhuǎn)化生長因子β1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人轉(zhuǎn)化生長因子αelisa試劑盒   人轉(zhuǎn)化生長因子α試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人轉(zhuǎn)化生長因子α試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)化生長因子α試劑盒、人轉(zhuǎn)化生長因子α elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

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