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產(chǎn)品簡介
腺病毒轉化的人胚腎細胞；AAV-293圖片售后：收到細胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細胞有質量問題（如污染，死亡，快遞運輸?shù)仍颍r，應出具書面質量問題報告并及時傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。
詳細介紹
腺病毒轉化的人胚腎細胞；AAV-293圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 腺病毒轉化的人胚腎細胞；AAV-293圖片
形態(tài)特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 我們推薦使用AAV-293細胞株繁殖腺病毒相關重組病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293細胞株，但產(chǎn)生的病毒滴度HEK293細胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉染的人胚腎細胞。 跟HEK293細胞一樣，AAV-293細胞反式表達腺病毒E1基因，當共轉染三個AAV助質粒(一個含ITR的質粒，pAAV-RC, 和E1缺失助質粒)時，可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關病毒顆粒。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(10+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X；CSF1PO:7,11,12；D13S317:12；D16S539:9,13；D18S51:17,18；D19S433:15,18；D21S11:28,30.2；D2S1338:19；D3S1358:15,17；D5S818:8,9；D7S820:11；D8S1179:12,14；FGA:23；TH01:7,9.3；TPOX:11；vWA:16,19
同工酶
染色體
使用權限 A類
腺病毒轉化的人胚腎細胞；AAV-293圖片細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
腺病毒轉化的人胚腎細胞；AAV-293圖片質量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，*進口來源，*保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
腺病毒轉化的人胚腎細胞；AAV-293圖片操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
130863-10 碘化丙啶干粉 10mg
CAS25535-16-4 碘化丙啶苯 10mg
CAS144-48-9 碘代乙酰胺 5g
131234-1 地塞米松溶液 ,50mg/mL 1mL
CAS50-02-2 地塞米松 100mg
90211-50 低載量 PCR 片段純化試劑盒 50 次
90211-100 低載量 PCR 片段純化試劑盒 100 次
130835-2.5 低熔點瓊脂糖 2.5g
130835-5 低熔點瓊脂糖 5g
100830-30 低 pH 緩沖液套裝 30 次
CAS9001-53-0 等離子體胺氧化酶 600U
CAS11028-71-0 刀豆球蛋白 A Ⅲ 50mg
CAS11028-71-0 刀豆蛋白 A IV 25mg
P001-1 蛋白質分析技術服務 1 個樣
70102C-10 蛋白質電泳分子量標準 (43.0-200.0KD) 10 次
70102A-15 蛋白質電泳分子量標準 (3.3-20.1KD) 15 次
70102B-20 蛋白質電泳分子量標準 (14.4-97.4KD) 20 次
P004-1 蛋白質表達與純化技術服務 一個蛋白