詳細(xì)介紹
SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19說(shuō)明書(shū)現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門(mén)。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。
產(chǎn)品名稱 | SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19說(shuō)明書(shū) |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存 |
細(xì)胞名稱 SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19說(shuō)明書(shū)
形態(tài)特性
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 在0.6mg/ml新霉素G418存在下,用溫度敏感的表達(dá)載體pUCSVisA58轉(zhuǎn)染自然流產(chǎn)的胎兒四肢組織,建立了此細(xì)胞系。 在許可溫度33.5oC下細(xì)胞分裂很快,而在限制溫度39.5oC下細(xì)胞極少分裂或不分裂。 這些細(xì)胞具有分化為表達(dá)造骨細(xì)胞表型的成熟造骨細(xì)胞的能力。 這些細(xì)胞提供了一個(gè)同質(zhì)化的快速增殖模型系統(tǒng),用于研究正常人造骨細(xì)胞的分化,造骨細(xì)胞生理和激素,生長(zhǎng)因子,和對(duì)造骨細(xì)胞的功能及分化有影響的細(xì)胞因子。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;0.3mg/ml G418
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19說(shuō)明書(shū)運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途:只可用于科研。
儲(chǔ)存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問(wèn)題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性,支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,全額退款。)公司針對(duì)每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞;hFOB 1.19說(shuō)明書(shū)操作步驟:
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周?chē)疂n吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。130863-10 碘化丙啶干粉 10mg
CAS25535-16-4 碘化丙啶苯 10mg
CAS144-48-9 碘代乙酰胺 5g
131234-1 地塞米松溶液 ,50mg/mL 1mL
CAS50-02-2 地塞米松 100mg
90211-50 低載量 PCR 片段純化試劑盒 50 次
90211-100 低載量 PCR 片段純化試劑盒 100 次
130835-2.5 低熔點(diǎn)瓊脂糖 2.5g
130835-5 低熔點(diǎn)瓊脂糖 5g
100830-30 低 pH 緩沖液套裝 30 次
CAS9001-53-0 等離子體胺氧化酶 600U
CAS11028-71-0 刀豆球蛋白 A Ⅲ 50mg
CAS11028-71-0 刀豆蛋白 A IV 25mg
P001-1 蛋白質(zhì)分析技術(shù)服務(wù) 1 個(gè)樣
70102C-10 蛋白質(zhì)電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (43.0-200.0KD) 10 次
70102A-15 蛋白質(zhì)電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3.3-20.1KD) 15 次
70102B-20 蛋白質(zhì)電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (14.4-97.4KD) 20 次
P004-1 蛋白質(zhì)表達(dá)與純化技術(shù)服務(wù) 一個(gè)蛋白
131121-100 蛋白折疊試劑盒 100 次