詳細介紹
一抗和二坑的區(qū)別:
第一抗體就是平常所說的抗體,即能和抗原特異性結合。
第二抗體是能和抗體結合的,即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。
一抗是針對抗原的抗體,二抗是針對一抗的抗體。即抗體也可以充當抗原刺激機體產生抗體。也就是說,抗原進入機體刺激機體免疫系統(tǒng)產生免疫應答,由B細胞可以產生與相應抗原發(fā)生特異性結合的特殊蛋白質。
一抗二抗都是一種可以特異結合別的物質的基團,而且一抗可以至少結合兩種其他基團(底物和二抗)。
一抗:可以特異結合底物,就是識別出我們想要檢測的東西。一抗和底物結合與否用肉眼是看不出來的。
二抗:可以和一抗結合,并帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發(fā)光或顯色基團),作用是檢測一抗。 如果一抗自己帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發(fā)光或顯色基團),則不需要二抗。但這樣成本很高,因為一種一抗只識別一種底物。所以如今的設計一般是二抗帶上可檢測標記,再來檢測一抗。而一抗識別底物。這樣,當一抗結合到底物上,就可以通過二抗檢測出來。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
中文名稱 | 磷酸化inaD蛋白抗體 |
英文名稱 | phospho-inaD (Thr666) |
規(guī)格 | 50ul 100ul 200ul |
產品分類 | 抗體 / 一抗 |
英文別名 inaD (phospho T666); p-inaD (phospho T666); Inactivation-no-after-potential D protein; inaD; INAD_DROME.
交叉反應 Firefly, Fruit Fly
標記 Unconjugated
抗體來源 Rabbit
抗體類型 Polyclonal
免疫原 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from Fruitfly inaD around the phosphorylation site of Thr666
蛋白細胞定位 細胞膜
純化方法 affinity purified by Protein A
亞型 IgG
性狀 Liquid
濃度 1mg/ml
儲存液 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件 Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
背景資料 Involved in the negative feedback regulation of the light-activated signaling cascade in photoreceptors through a calcium-mediated process. Interacts with tetrapeptide ligand located in C-terminal sequence of 3 key components of the visual cascade, tethering them and forming a macromolecular signaling phototransduction complex.
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備 | 2. 免疫動物 | 4. 免疫血清 |
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。 小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。 | 常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。 3. 免疫血清的收集 一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。 | 純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化 ,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有 高效,特異性強,純度高的特定。接著要 鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、 純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建 議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。 |
抗體作用:
1、中和毒素和阻止病原體入侵,抗體在體外可發(fā)生各種抗原、抗體結合反應,有利于抗原或抗體檢測、功能判斷,在體內可中合毒素、阻斷病原體入侵、清除病原微生物。
2、激活補體產生攻膜復合物,使細胞溶解破壞,抗體與相應抗原結合后,可通過經典途徑激活補體系統(tǒng),產生多種效應功能。
3、調理吞噬和抗體依賴的細胞介導的細胞毒性作用,調理作用是指IgG抗體的FC段與中性粒細胞、巨噬細胞表面下段FC受體結合,從而增強吞噬細胞的吞噬作用??贵w依賴的細胞介導的細胞毒性作用是指具有殺傷活性的細胞,如NK細胞,通過其表面的FC受體,識別包被于靶細胞表面抗原上的抗體FC段,直接殺傷靶細胞。
4、介導Ⅰ型超敏反應。
5、穿過胎盤屏障和黏膜,IgG是能夠通過胎盤的抗體,對于新生兒的抗感染具有重要意義。
6、分泌型的IgA可通過呼吸道和消化道黏膜,在黏膜局部免疫中發(fā)揮重要的免疫防御作用。
優(yōu)勢:
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實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
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