蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Eukaryotic Trehalase (TREH)

TRE; TREA; Brush Border Membrane Glycoprotein; Alpha,Alpha-Trehalase; Alpha,Alpha-Trehalose Glucohydrolase

型號：GOY-01D3074

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：真核表達(dá)

宿主293F cell

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜

預(yù)測分子量：62.4kDa

實(shí)際分子量：63kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Leu21~Ser553 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：5.2

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

Recombinant Myeloperoxidase (MPO)產(chǎn)品名稱：髓過氧化物酶(MPO)重組蛋白物種：Cattle，牛酶與激酶

Recombinant Gamma-Glutamyl Hydrolase (gGH)產(chǎn)品名稱：γ-谷氨酰水解酶(gGH)重組蛋白物種：Human，人GH; conjugase, folylpolygammaglutamyl hydrolase; Gamma-Glu-X carboxypeptidase

Recombinant Calpain 3 (CAPN3)產(chǎn)品名稱：鈣3(CAPN3)重組蛋白物種：Human，人CANPL3; p94; LGMD2; LGMD2A; nCL1; Calcium-activated neutral proteinase 3; Muscle-specific calcium-activated neutral protease 3; New calpain 1

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

AGS(人胃腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

野;Scutellarin 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

 CTLL-2(小鼠T細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

遠(yuǎn)志皂苷元;Tenuigenin 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

 A875(人黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

鷹嘴豆芽素A;Biochanin A 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞英文名稱：NIH3T3

異去氫鉤藤堿;Isocorynoxein 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

 胎兒表角細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

異甘草素;Isoliquiritigen 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

 42℃生長培養(yǎng)基/42℃ Growth Medium副溶血弧菌42℃生長試驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

柚皮苷;Naringin 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

 人神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

延胡索乙素;Tetrahydropalm 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

 Orchimax培養(yǎng)基(含木炭)/Orchimax Medium with charcoalBR10升國產(chǎn)/進(jìn)口

淫羊藿苷;Icariin 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢

海藻糖酶(TREH)真核蛋白小鼠人Gremlin-1蛋白(GREM1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

1瓶 MRC-5細(xì)胞株 MRC-5 低溫運(yùn)輸和保存

2 ug pBlueScript II SK（+） pBlueScript II SK（+） 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

豬乙酰受體抗體(AChRab)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

500mL Acrylamide: Bis-acrylamide Solution（丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液），37.5:1   Acrylamide: Bis-acrylamide Solution，37.5:1   常溫保存

牛生長激素釋放多肽(GHRP)免疫試劑盒

1瓶 TM3細(xì)胞株 TM3 低溫運(yùn)輸和保存

人克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

胰胨大豆胨固綠瓊脂 Tryptic Soy Fast Green Agar 250g

人酸性神經(jīng)鞘磷脂(ASM)免疫試劑盒

大鼠乳腺癌標(biāo)志物-CA153免疫試劑盒進(jìn)口、分裝