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己糖激酶1(HK1)重組蛋白人

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更新時(shí)間:2023-03-06 09:18:29瀏覽次數(shù):156

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D323 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Hexokinase 1 (HK1)
物種 Homo sapiens (Human,人)    
己糖激酶1(HK1)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:豬胰島素(INS)ELISA試劑盒96T 0.625-40 ng/ml肌醇三磷酸(Inositol trisphosphate)ELISA試劑盒96T 0.625-40 ng/mL人帶肽重復(fù)序列結(jié)構(gòu)域1的干擾素誘導(dǎo)表達(dá)蛋白(IFIT-1)ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL

詳細(xì)介紹

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

英文名稱:Recombinant Ornithine Decarboxylase (ODC)  產(chǎn)品名稱:脫羧酶(ODC)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

英文名稱:Recombinant Focal Adhesion Kinase (FAK)  產(chǎn)品名稱:粘著斑激酶(FAK)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

英文名稱:Recombinant Adenylate Cyclase 5 (ADCY5)  產(chǎn)品名稱:腺苷酸環(huán)化酶5(ADCY5)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Adenylate Cyclase 6 (ADCY6)  產(chǎn)品名稱:腺苷酸環(huán)化酶6(ADCY6)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Adenylate Cyclase 10, Soluble (ADCY10)  產(chǎn)品名稱:腺苷酸環(huán)化酶10(ADCY10)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

英文名稱:Recombinant Adenylate Cyclase 10, Soluble (ADCY10)  產(chǎn)品名稱:腺苷酸環(huán)化酶10(ADCY10)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

己糖激酶1(HK1)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D323

 

 

英文名稱:Recombinant Hexokinase 1 (HK1)

HK1-Ta; HK1-Tb; HK1-Tc; HKI; HXK1; Brain form hexokinase

型號(hào):GOY-01D323

酶與激酶

代謝通路

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::線粒體

預(yù)測(cè)分子量:16.5kDa

實(shí)際分子量:17kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽:Phe80~Met215 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):7.2

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

分支酶GBE1抗體 GBE1

4號(hào)染色體開放閱讀框51抗體 C4orf51

磷酸化絲切蛋白抗體 phospho-Cofilin (Ser24)

補(bǔ)體成分5受體1抗體 C5R1

細(xì)胞分裂周期2樣蛋白激酶6抗體 CDC2L6

補(bǔ)體C3IP1抗體 C3IP1

磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2抗體 Phospho-CHK2 (Thr68)

周期素依賴性激酶11抗體 CDK11

8號(hào)染色體開放閱讀框86抗體 C8orf86

磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25B抗體 phospho-Cdc25B (Ser323)

周期素依賴性激酶10 CDK10

磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25B抗體 phospho-Cdc25B (Ser186)

己糖激酶1(HK1)重組蛋白人苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti棗椰球擬酵母 Torulopsis dattila

瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus玉蜀黍赤霉 Gibberella zeae

CHO(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)人胰腺星狀細(xì)胞培養(yǎng)基

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

SP2∕0全細(xì)胞裂解液桿菌屬 Lactobacillus sp.

解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica串珠鐮孢 Fusarium moniliforme

KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞暫無(wú) Microbacterium ammoniaphilum

宇佐美曲霉 Aspergillus usamii毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

SP2/0, 小鼠骨髓瘤細(xì)胞香菇 Lentinula edodes

人子宮平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基LncaP, 人前列腺細(xì)胞

MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

膠凍樣芽胞桿菌 Bacillus mucilaginosus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis香菇 Lactarius camphoratus

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