蛋白激酶Cδ(PKCd)重組蛋白小鼠公司正在出售的產(chǎn)品：人發(fā)動(dòng)蛋白2(Dynamin-2)ELISA試劑盒96T 15.6-1000 pg/mL人多巴色素異構(gòu)酶(DT)ELISA試劑盒96T 0.312-20 ng/mL人脫氧核糖核酸酶1(Deoxyribonuclease-1)ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL

產(chǎn)品屬性：

 

 

產(chǎn)品名稱：蛋白激酶Cδ(PKCd)重組蛋白小鼠

英文名稱：Recombinant Protein Kinase C Delta (PKCd)

PKC-D; MAY1; PRKCD; SDK1; NPKC-Delta; Tyrosine-protein kinase PRKCD; Sphingosine-dependent protein kinase-1

型號(hào)：GOY-01D197

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜, 細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：43.9kDa

實(shí)際分子量：44kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Asn328~Ile674 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：5.6

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Alpha 3 (GSTa3)  產(chǎn)品名稱：S轉(zhuǎn)移酶α3(GSTa3)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Prealbumin (PALB)  產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(PALB)重組蛋白物種：Chicken (Gallus，雞)

英文名稱：Recombinant Caspase 8 (CASP8)  產(chǎn)品名稱：胱天8(CASP8)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名稱：Recombinant Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial (SOD2)  產(chǎn)品名稱：線粒體超氧化物歧化酶(SOD2)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Pi (GSTp)  產(chǎn)品名稱：S轉(zhuǎn)移酶π1(GSTp)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Pi (GSTp)  產(chǎn)品名稱：S轉(zhuǎn)移酶π1(GSTp)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

 

 

 

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

膠原樣蛋白抗體 COL20A1

原癌基因CD39樣蛋白4抗體 CD39L4

腫瘤易感性候選基因5抗體 CASC5

鈣調(diào)蛋白激酶激酶β抗體 CAMKK2

中心體肌動(dòng)蛋白γ1/增強(qiáng)型PI3K蛋白抗體 Centaurin gamma 1

細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白JPO2抗體 CDCA7L

半胱胺酸-2抗體 Caspase 2

7號(hào)染色體開放閱讀框63抗體 C7orf63

膠原三股螺旋重復(fù)蛋白1抗體 CTHRC1

20號(hào)染色體開放閱讀框72抗體 c20orf72

CD2結(jié)合蛋白3抗體 CD2BP3

2號(hào)染色體開放閱讀框6抗體 C2orf6

蛋白激酶Cδ(PKCd)重組蛋白小鼠BPH-1, 人前列腺增生細(xì)胞人肺成纖維細(xì)胞

楊氏檸檬酸桿菌 Citrobacter youngae人淋巴成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

JEC, 人子宮內(nèi)膜腺細(xì)胞系破裂正青霉 Eupenicillium fractum

貝葉多孔菌根瘤菌

人皮膚肥大細(xì)胞培養(yǎng)基貓腎細(xì)胞

放射形土壤桿菌 Agrobacterium radiobacter宇佐美曲霉 Aspergillus usamii

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae抗生鏈霉菌 Streptomyces antibioticus

芽胞桿菌 Bacillus sp.CaCO2全細(xì)胞裂解液

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

大腸桿菌 Escherichia coli毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

MuM-2B(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

根瘤菌香菇 Lentinula edodes