化工儀器網
詳細介紹
產品屬性：
| 產品名稱 | 5637 (人膀胱癌細胞) |
| 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng) |
| 貨號 | GOY-01X0002 |
名稱 5637 (人膀胱癌細胞) (STR鑒定正確)
種屬 人類
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
背景描述 5637細胞能生成SCF、IL-1、IL-3、IL-6、G-CSF、GM-CSF等。
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 RPMI-1640(PM150110)＋10% FBS(164210-500)＋1% P/S(PB180120)
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~24-36小時
凍存條件 凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃
致瘤性 Yes, within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.
注意事項 該細胞較難消化，注意延長消化時間，消化到細胞收縮變圓，輕拍培養(yǎng)瓶側邊，細胞可以滑落方可終止消化。
保藏機構 ATCC; HTB-9 DSMZ; ACC-35
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
豬皰疹病毒(PHV)核酸檢測試劑盒 48T
豬圓環(huán)病毒通用型(PCV-U)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
豬圓環(huán)病毒通用型(PCV-U)核酸檢測試劑盒 48T
豬圓環(huán)病毒通用型(PCV-Ⅰ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
豬圓環(huán)病毒通用型(PCV-Ⅰ)核酸檢測試劑盒 48T
豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸檢測試劑盒 48T
豬乙型腦炎病毒(JEV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
豬乙型腦炎病毒(JEV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T
豬水泡性口炎病毒(VSV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
豬水泡性口炎病毒(VSV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T
傳染性胃腸炎病毒(PTGV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
傳染性胃腸炎病毒(PTGV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T
水泡病毒(SVDV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
水泡病毒(SVDV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T
傳染性胸膜肺炎(APP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
傳染性胸膜肺炎(APP)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T
鉤端螺旋體(Lep)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
鉤端螺旋體(Lep)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T
豬內源性逆轉錄病毒(PERV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
豬內源性逆轉錄病毒(PERV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) 48T
腺苷A1A受體抗體
芳基硫酸酯酶B抗體
γ氨基丁酸轉氨酶抗體
共濟失調蛋白2結合蛋白1抗體
腫瘤壞死因子α轉換酶
芳香烴受體核轉錄蛋白2抗體
AlkB同源蛋白8抗體
ABI基因家族成員3結合蛋白抗體
游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒
游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒
游離蛋白S(FP-S)ELISA試劑盒
游離雌三醇(FE3)ELISA試劑盒
游離β絨毛膜促性腺激素(f-βhCG)ELISA試劑盒
幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒
幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒
幽門螺桿菌細胞毒素相關基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA試劑盒
優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒
硬骨素(SOST)ELISA試劑盒
5637 (人膀胱癌細胞)印度刺猬因子(IHH)ELISA試劑盒
隱熱蛋白(NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1)ELISA試劑盒
吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA試劑盒
音猬因子N端(Shh-N)ELISA試劑盒
音猬因子(SHH)ELISA試劑盒
化工儀器網