詳細(xì)介紹
商品介紹:
PK(EC 2.7.1.40)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化糖酵解過程中的最后一步反應(yīng),是糖酵解過程中的主要限速酶之一,也是產(chǎn)生ATP的關(guān)鍵酶之一,因此測(cè)定PK活性具有重要意義。
測(cè)定原理
PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸,乳酸脫氫酶進(jìn)一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+,在340nm下測(cè)定NADH下降速率,即可反映PK活性。
需自備的儀器和用品
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 測(cè)試方法 | 貨號(hào) |
丙酮酸激酶(PK)紫外分光光度法測(cè)試盒 | 50管/48樣 | 紫外分光光度法 | GOY-01S6599 |
劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
測(cè)定操作表:
酶活性計(jì)算公式:
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個(gè)酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量)÷T= 18×A460÷細(xì)胞數(shù)量
(4) 按液體體積計(jì)算
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε:氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù):7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)中樣本體積,0.05mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時(shí)間,30min
b. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個(gè)酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
一步式 RT-PCR Mix 1mL 動(dòng)物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒100 次
免 RNA 提取 RT-PCR 試劑盒 100 次 動(dòng)物上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒50 次 動(dòng)物 RNAout(TRIzol) 250mL
即用型熒光定量 RT-PCR 試劑盒300 次 動(dòng)物 RNAout(TRIzol) 100mL
通用型全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次 動(dòng)物 DNAout250mL
電泳級(jí)丙溶液 ( 干粉型 )200mL 冷凍型血液 RNA 保存液100mL
電泳級(jí)甲叉雙丙 25g 酪蛋白50g
電泳級(jí) TEMED1.5mL 昆蟲種屬鑒定 PCR Mix100 次
電泳級(jí)過0.1gx10 昆蟲細(xì)胞裂解液50mL
電泳級(jí)尿素100g 口腔角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
大鼠Ⅱ型膠原(COL2)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠Ⅱ型膠原α1(COL2α1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠Ⅱ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅡ)elisa檢測(cè)試劑盒
丙酮酸激酶(PK)紫外分光光度法測(cè)試盒動(dòng)物 RNAout(TRIzol) 250mL 柱式質(zhì)粒 DNAout50 次
柱式動(dòng)物 RNAout50 次 柱式質(zhì)粒 DNAout100 次
大提柱式動(dòng)物 RNAout5次 柱式植物油 DNAout50 次
柱式動(dòng)物 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次 柱式植物葉綠體 DNAout15 次
血液 RNAout 50 次 柱式植物 RNAout50 次
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