產(chǎn)品名稱(chēng):酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)可見(jiàn)分光光度法測(cè)試盒
規(guī)格 : 25管/24樣
測(cè)試方法: 可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào):GOY-01S6637
分類(lèi):脂肪酸代謝系列
商品介紹:
AAT是一個(gè)多功能蛋白大家族,主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種酰基化和去?;磻?yīng),在基因表達(dá)、代謝和信號(hào)傳導(dǎo)中具有重要作用。
測(cè)定原理:
AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙?;蕉〈迹尫诺?/span>CoA還原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,測(cè)定412 nm吸光度增加速率可計(jì)算AAT活性。
自備儀器和用品:
研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱(chēng)取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子4 鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子GEFT抗體
0酸化紅細(xì)胞膜條帶4.1蛋白抗體 鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子FARP2抗體
0酸化蛋白激酶受體B1抗體 鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子CLLD7抗體
蛋白激酶受體B1+B2抗體 鳥(niǎo)嘌呤核苷酸交換因子4
0酸化神經(jīng)細(xì)胞鳥(niǎo)苷酸置換因子Ephexin1抗體 鳥(niǎo)苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體
猴抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)elisa分析檢測(cè)試劑盒
猴可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
猴可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
猴尿微量白蛋白(ALB)elisa分析檢測(cè)試劑盒
猴(COR)elisa分析檢測(cè)試劑盒
?;D(zhuǎn)移酶(AAT)可見(jiàn)分光光度法測(cè)試盒單核增生李斯特菌 白色念珠菌AS2.2086凍干粉南京便診
蘇云金芽胞桿菌蘇云金變種 Bacillus thuringeinsis subsp. thuringeinsis 酪梭菌
酵母 微黃八疊球菌
黃直絲鏈霉菌 裂褶菌
鮑氏志賀菌凍干粉 施氏假單胞菌
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