產(chǎn)品名稱(chēng):土壤蔗糖酶(SSC)可見(jiàn)分光光度法測(cè)試盒
規(guī)格 : 50管/24樣
測(cè)試方法: 可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào):GOY-01S6828
分類(lèi):土壤系列
商品介紹:
S-SC能夠水解蔗糖變成相應(yīng)的單糖而被機(jī)體吸收,其酶促作用產(chǎn)物與土壤中有機(jī)質(zhì)、氮、磷含量,微生物數(shù)量及土壤呼吸強(qiáng)度密切關(guān),是評(píng)價(jià)土壤肥力的重要指標(biāo)。
測(cè)定原理:
S-SC催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收增加速率與S-SC活性成正比。
自備用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
![圖1.jpg 圖1.jpg](https://img79.chem17.com/6fd5d5abffebbb9ed335c4c118e4aa5a4cc96617583a8b6318951f0d5a2f8a01cd4eb95835263106.jpg)
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱(chēng)取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
超快核酸銀染試劑盒1000mL 人粒細(xì)胞分離液 1.113200mL
化乙錠干粉 (EB)1g 人單核細(xì)胞分離液 1.075200mL
化乙錠溶液 ,10 mg/mL1.5mL 人白細(xì)胞分離液 1.078200mL
化乙錠清除劑100 次 人 NK 細(xì)胞分離液 1.062200mL
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (50-500 bp)50 次 醛基磁珠2mL
軟骨 RNAout50 次 柱式真菌 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次
柱式軟骨 RNAout50 次 柱式真菌 DNAout50 次
石蠟包埋組織 RNAout30 次 柱式藻類(lèi) RNAout50 次
免 RNA 提取 FFPE RT-PCR 試劑盒30 次 柱式血液 RNAout50 次
柱式昆蟲(chóng) RNAout50 次 柱式血液 mtDNAout,測(cè)序級(jí)10 次
倉(cāng)鼠elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
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RNA 級(jí) Tris Base( 三羥甲基氨基 )100g 真菌種屬鑒定 PCR Mix 3100 次
剪切式勻漿機(jī)1臺(tái) 真菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次
1μL 超微量分光光度計(jì)1個(gè) 真菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次
帶柄尼龍篩1個(gè) 真菌 RNAout50 次
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