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產(chǎn)品名稱:土壤亮氨酸氨基肽酶(SLAP)微量法測(cè)試盒
規(guī)格 : 100管/48樣
測(cè)試方法: 微量法
貨號(hào):GOY-01S6855
分類:土壤系列
商品介紹:
S-LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性變化與機(jī)體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。
測(cè)定原理:
S-LAP分解L-亮氨酰對(duì)硝基苯胺生成對(duì)硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算S-LAP活性。
自備用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
![圖1.jpg 圖1.jpg](https://img79.chem17.com/6fd5d5abffebbb9ed335c4c118e4aa5a4cc96617583a8b6318951f0d5a2f8a01cd4eb95835263106.jpg)
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
液相內(nèi)毒素清除劑500 次 通用型 RT-LAMP 試劑盒50 次
固相內(nèi)毒素清除劑100g 通用型 LAMP 試劑盒50 次
固相內(nèi)毒素清除劑500g 通用 miRNA 克隆接頭0.83nmol
柱式內(nèi)毒素清除劑1.5mL 填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 C5次
內(nèi)毒素清除專用親和介質(zhì)5mL 填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 B5次
填入法 DNA 末端標(biāo)記試劑盒 C5次 接頭 DNA(Sal I-Sma I)5nmol
DNA 5’末端標(biāo)記試劑盒10 次 接頭 DNA(pSma I)5nmol
dNTP 溶液 ( 標(biāo)記專用 )0.5mL 接頭 DNA(Hind Ⅲ -Sma I)5nmol
標(biāo)記 dUTP 溶液50μL 接頭 DNA(EcoR I-Sma I)5nmol
Aminoally-dUTP 溶液,10mM100μL 接頭 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I)5nmol
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)活性測(cè)定試劑盒
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)活性測(cè)試盒
γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶γ-GT測(cè)試盒 96T 100管/50樣 微板法
吖啶橙染色試劑盒100T
吖啶橙染色液100T
土壤亮氨酸氨基肽酶(SLAP)微量法測(cè)試盒miRNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)30 次 鳥(niǎo)類種屬鑒定 PCR Mix100 次
微量 RNA 助沉劑0.1mL 尼龍膜,13×20cm1張
微量 DNA 助沉劑0.1mL 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
DNA 級(jí) Acryl 助沉劑1mL 內(nèi)毒素清除專用親和介質(zhì)5mL
彩色 Acryl 助沉劑1g 內(nèi)毒素清除專用親和介質(zhì)50mL
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。