小鼠骨粘連蛋白(ON)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱：Mouse osteonectin,ON ELISA Kit      檢測(cè)方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱：Mouse osteonectin,ON ELISA Kit 
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途：科研與實(shí)驗(yàn)試劑，不得用于臨床診斷。
標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠骨粘連蛋白(ON)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻，靜置1小時(shí)備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠骨粘連蛋白(ON)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或 者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6. 組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠骨粘連蛋白(ON)elisa試劑盒操作步驟操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個(gè)濃度）、空白孔、待測(cè)樣品組。 注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中；空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。 
注意事項(xiàng)：
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本），如果對(duì)本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商， 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠骨粘連蛋白(ON)elisa試劑盒操作步驟安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
2． 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

米曲霉 Aspergillus oryzae

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

宇佐美曲霉B變種 Aspergillus usamii var. B1

大鼠真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis

厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydospora

巨大芽胞桿菌 Bacillus megaterium

異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala

宇佐美曲霉 Aspergillus usamii

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

氣單胞菌屬 Aeromonas sp.

膠凍樣芽胞桿菌 Bacillus mucilaginosus

側(cè)耳 Pleurotus sp.

Caki-1, 人腎透細(xì)胞皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞

人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

HEL(人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

粘紅酵母 Rhodotorula glutinis

I型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL Streptavidin:SureLight B-PE （1 mg）Streptavidin:SureLight B-PE

生物素標(biāo)記乙?；M蛋白H4多肽Biotinylated Acetyl Histone H4 Peptide （100 ul）

Z-YVAD-FMK， Caspase-1抑制劑（氟甲基酮）Z-YVAD-FMK

Sunitinib Maleate， SU-11248， Sutent， PHA-290940AD， PNU-290940ADSunitinib Malate （Sutent）

4-（Acetylamino）-N-（2-aminophenyl）benzamide， Acetyldinaline， GCI-994

Z-Leu-Leu-Leu-CHO； Z-LLL-CHOMG-132

2-[[3-（3，4-Dimethoxyphenyl）-1-oxo-2-propenyl]amino]benzoic acid； SB 252218Tranilast

N-[（5aR，6aS，7S，9Z，10aS）-9-[amino（hydroxy）methylidene]-4，7-bis（dimethylamino）-1，10a，12-trihydroxy-8，10，11-trioxo-5，5a，6，6a，7，8，9，10，10a，11-decahydrotetracen-2-yl]-2-（tert-butylamino）acetamideTigecycline

3，5，7，3’，4’-PentahydroxyflavoneQuercetin， Dihydrate

N-（3-（Aminomethyl）benzyl）acetamidine . 2HCl1400W dihydrochloride

5-Dehydroepiandrosterone； Dehydroisoandrosterone； PrasteroneDHEA

3-Methyl-3H-purin-6-amine； 3-MA； NSC 663893-Methyladenine

小鼠骨粘連蛋白(ON)elisa試劑盒操作步驟Hydroxy-2，3-dixopyrrolidine-3-sulfonic acid sodium salt； Sulfo-NHS； SNHS； N-Hydroxysulfosuccinimide sodium saltSulfo-NHS

N-Acetyl-D-erythro-sphinganine； Dihydroceramide-C2C2-Dihydroceramide

（R）-N-（3-aminopropyl）-N-（1-（3-benzyl-7-chloro-4-oxo-3，4-dihydroquinazolin-2-yl）-2-methylpropyl）-4-methylbenzamide； Ispinesib； CK0238273SB-715992

2-（4-tert-Butylphenyl）-1H-benzimidazole， 2-[4-（1，1-Dimethylethyl）phenyl]-1H-benzimidazoleZLN005