詳細(xì)介紹
小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)elisa試劑盒操作步驟 英文名稱(chēng):Mouse Bone morphogenetic protein 6,BMP-6 ELISA Kit 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)elisa試劑盒操作步驟一、標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)elisa試劑盒操作步驟二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品,按照1:100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
屎腸球菌 Enterococcus faecium
圍小叢殼 Glomerella cingulata
黃色籃狀菌
真核細(xì)胞膜蛋白抽提試劑(帶酶抑制劑)50次國(guó)產(chǎn)
三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii
SW 780(人膀胱移行細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
涇陽(yáng)鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
酸球菌 Lactococcus lactis
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
小鼠睪間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞英文名稱(chēng):MLTC-1
MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞
瓦克青霉 Penicillium waksmanii
SK-Hep-1(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Molt-4/急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞株國(guó)產(chǎn)gersion
紫芝 Ganoderma japonicum
慶豐鏈霉菌 Streptomyces qingfengmyceticus
Neuro-2a/N2a(小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
毛柄金錢(qián)菌(金針菇) Flammulina velutipes
雙孢蘑菇
R 1610(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
冬蟲(chóng)夏草 Cordyceps sinensis
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti Tosyllysine Chloromethyl Ketone (hydrochloride) (100 mg)N-[5-ami-(2-chloroacetyl)pentyl]-4-methyl-benzenesulfonamide, monohydrochloride; TLCK|1-Chloro-3-Toxylamide-7-Amino-L-2-Heptanone; Tosyllysine Chloromethyl Ketone (hydrochloride)
Chaetocin (1 mg)2,2’,3S,3’S,5aR,5’aR,6,6’-octahydro-3,3’-bis(hydroxymethyl)-2,2’-dimethyl-[10bR,10’bR(11aS,11’aS)-bi-3,11a-epidithio-11aH-pyrazi’,2’:1,5]pyrrolo[2,3-b]indole]-1,1’,4,4’-tetrone; Chaetocin
3-dodecanoyl-NBD Cholesterol (5 mg)12-[(7-nitro-2,1,3-benzoxadiazol-4-yl)amino]-(3S,10R,13R)-3-methoxy-10,13-dimethyl-17-((R)-6-methylheptan-2-yl)-tetradecahydro-1H-cyclopenta[α]phenanthrene; 3-C12-NBD Cholesterol; 3-dodecanoyl-NBD Cholesterol
CB-86 (5 mg)N-cyclopropyl-8-[3-(1,1-dimethylheptyl)-5-hydroxyphenoxy]-oct*; CB-86
LY364947 (25 mg)4-[3-(2-pyridinyl)-1H-pyrazol-4-yl]-quinoline; TGF-β RI Kinase Inhibitor|HTS 466284; LY364947
(+)-Warfarin (5 mg)4-hydroxy-3-[(1R)-3-oxo-1-phenylbutyl]-2H-1-benzopyran-2-one; (R)-Warfarin; (+)-Warfarin
JWH 019 (25 mg)(1-hexyl-1H-indol-3-yl)-1-naphthalenyl-methanone; JWH 019
16,16-dimethyl-6-keto Prostaglandin E1 (10 mg)6,9-dioxo-11。alpha。,15R-dihydroxy-16,16-dimethyl-prost-13E-en-1-oic acid; 16,16-dimethyl-6-keto PGE1; 16,16-dimethyl-6-keto Prostaglandin E1
Pirfenidone (5 mg)5-methyl-1-phenyl-2(1H)-pyridinone; AMR 69|Deskar|Pirespa; Pirfenidone
小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)elisa試劑盒操作步驟16-phenoxy tetranor Prostaglandin E2 (5 mg)9-oxo-11a,15R-dihydroxy-16-phenoxy-17,18,19,20-tetranor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 16-phenoxy tetranor PGE2; 16-phenoxy tetranor Prostaglandin E2
Prostaglandin F2α ethyl amide (10 mg)N-ethyl-9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-amide; PGF2α-NEt|Dinoprost ethyl amide; Prostaglandin F2α ethyl amide