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人異常凝血酶原(APT)elisa試劑盒實驗方法

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更新時間:2017-03-09 14:03:04瀏覽次數(shù):193

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

用途:本試劑盒僅供科研使用,定量檢測細胞液、體液、組織、血清、血漿等標本人異常凝血酶原(APT)elisa試劑盒實驗方法的含量。

詳細介紹

人異常凝血酶原(APT)elisa試劑盒實驗方法     英文名稱:Human Abnormal prothrombin,APT ELISA Kit      檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱:Human Abnormal prothrombin,APT ELISA Kit 
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷。
標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
人異常凝血酶原(APT)elisa試劑盒實驗方法實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
人異常凝血酶原(APT)elisa試劑盒實驗方法樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或 者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人異常凝血酶原(APT)elisa試劑盒實驗方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準 品組(6 個濃度)、空白孔、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設(shè)置復孔。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 50ul 后,再加入顯色劑 B 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復性。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失。
人異常凝血酶原(APT)elisa試劑盒實驗方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑AB和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

FUCA1/Alpha L fucosidase I  α-L巖藻糖苷酶抗體 0.2ml

HBcAg(1H8)  人乙型肝炎核心抗原單克隆抗體規(guī)格: 0.1ml

Slc22a5  溶質(zhì)載體家族蛋白22成員5抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-Tau protein(Thr205)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

CCDC30  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白30抗體規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-human IgM/PE-CY5  PE-CY5標記的羊抗人IgM規(guī)格: 0.1ml

Lactoferrin  鐵蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

O-GlcNAc transferase  ON-乙酰葡萄糖胺OGT抗體規(guī)格: 0.2ml

RBBP5  視網(wǎng)膜母細胞瘤結(jié)合蛋白5抗體規(guī)格: 0.2ml

KIF20A/MKLP2  有絲分裂驅(qū)動蛋白樣2抗體規(guī)格: 0.2ml

SIP1/ZEB-2  運動神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-BAD(Ser75)  磷酸化相關(guān)死亡促進因子抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-ADRB2 (Ser261)  磷酸化上素能受體β2抗體規(guī)格: 0.1ml

IL-17B  白介素-17B抗體規(guī)格: 0.1ml

WWP1  WW結(jié)構(gòu)域E3泛素連接酶1抗體規(guī)格: 0.2ml

CD10/MME/Neprilysin  金屬肽鏈內(nèi)切酶抗體規(guī)格: 0.1ml

NDUFV2  NADH脫氫酶黃素蛋白2抗體規(guī)格: 0.1ml

APG5L/ATG5  自噬蛋白5/細胞凋亡的特異性蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

Myoglobin  肌紅蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

TCF12/HEB  轉(zhuǎn)錄因子12抗體規(guī)格: 0.2ml

CTAG1B/Cancer/testis antigen 1  /睪抗原1B 0.2ml瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus

刺孢吸水鏈霉菌 Streptomyces hygrospinosus

大鼠腎系膜細胞*培養(yǎng)基100mL

檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

A875(人黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2

酒假絲酵母 Candida kefyr

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元gersion

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

栗色渾圓鏈霉菌 Streptomyces castaneoglobosus

人膽囊細胞英文名稱:GBC-SD

葡枝根霉 Rhizopus stolonifer

貝葉多孔菌

Annexin V-FITC/PI雙染法細胞凋亡檢測試劑盒規(guī)格:20

大鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

伯頓擬內(nèi)孢霉 Endomycopsis burtonii

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

NCI-H2452(人間皮瘤細胞)5×106cells/瓶×2

粉孢 Oidium lactis

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

NCI-N87(人胃細胞)5×106cells/瓶×2gersion

人異常凝血酶原(APT)elisa試劑盒實驗方法宋內(nèi)氏志賀氏菌 Shigella sonnei

始旋鏈霉菌 Streptomyces pristinaespiralis

人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

漢遜德巴利酵母 Aspergillus restrictus

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