我司全程提供細(xì)胞生物體、生長(zhǎng)特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應(yīng)用、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說明書信息,我們專業(yè)您的細(xì)胞系實(shí)驗(yàn),讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾!產(chǎn)品僅用于科研
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名稱 Daudi (Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱 DAUDI; NK-10A; NK-10a; NK 10a; NK10a; GM03190; GM3190; GM17346
種屬 人類
年齡(性別) 男性,16歲
組織來源 外周血;B淋巴母細(xì)胞;Burkitt's淋巴瘤
生長(zhǎng)特性 懸浮細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣
背景描述 Daudi細(xì)胞是由E·Klein和G·Klein于1967年5月從一位16歲黑人男性Burkitt's淋巴瘤患者建立的。Daudi細(xì)胞表面免疫球蛋白陽性(sIg+)、Β2-微球蛋白陰性,EBNA陽性,并有衣殼抗原VCA;Daudi細(xì)胞攜帶EB病毒。Daudi細(xì)胞是典型的B淋巴母細(xì)胞,廣泛應(yīng)用于白血病發(fā)生機(jī)理的研究。
生物安全等級(jí) 2
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 3×10^5-5×10^5cells/mL
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~24-48小時(shí)
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
致瘤性 Yes, in nude mice; forms colonies in agarose.
受體表達(dá)情況 complement, expressed; Fc, expressed
注意事項(xiàng) 該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,請(qǐng)注意離心收集細(xì)胞懸液;請(qǐng)勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CCL-213 BCRC; 60192 Coriell; GM03190 Coriell; GM17346 DSMZ; ACC-78 ECACC; 85011437 ECACC; 94071449
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
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使用方法:
收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1.取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.細(xì)胞傳代
1)吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
4× 核酸液相雜交液10mL 核酸清除劑1.5mL
DNA 稀釋液10mL 核苷酸類似物法易錯(cuò) PCR 試劑盒15 次
DNA 溶解液10mL 海藻糖溶液,1.5M,PCR 級(jí)1.5mL
微量雙鏈 DNA 定量試劑盒1mL 海量 PCR 片段純化試劑盒5次
微量單鏈 DNA 定量試劑盒1mL 還原劑兼容型 BCA 蛋白定量試劑盒250 次
大鼠膜相關(guān)磷脂酶A2(PLA2G2A)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
大鼠膜聯(lián)蛋白IV(ANX-IV)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠膜聯(lián)蛋白I(ANX-I)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(AMH)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
Daudi (Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)XTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒250T
XTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒500T
X線膠片 100張
YT培養(yǎng)基 YT Broth 250g
α1微球蛋白α1- MG試劑盒 R1:40ml×1 R2:10ml×1 膠乳增強(qiáng)
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。