詳細介紹
我司全程提供細胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應用、組織、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息,我們專業(yè)您的細胞系實驗,讓您實驗再無煩擾!產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0238 |
名稱 U-937 (組織細胞淋巴瘤細胞) (STR鑒定正確)
別稱 U937; U 937
種屬 人類
年齡(性別) 男性,37歲
組織來源 組織細胞淋巴瘤
生長特性 懸浮細胞
細胞形態(tài) 單核細胞
背景描述 U-937細胞是由Sundstrom和Nilsson于1974年建立,取材于患組織細胞淋巴瘤病人的胸水。研究表明:U-937細胞能被人混合淋巴細胞培養(yǎng)上清,佛波脂、D3、γ干擾素、腫瘤壞死因子和維甲酸誘導終末單核細胞分化。U-937細胞免疫球蛋白產(chǎn)物和EB病毒表達為陰性;U-937細胞表達Fas抗原且對TNF和抗-Fas抗體敏感。
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 3×10^5-5×10^5cells/mL
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~30-60小時
凍存條件
凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
受體表達情況 complement (C3)
基因表達情況 lysozyme; beta-2-microglobulin (beta 2 microglobulin); tumor necrosis factor (TNF), also known as tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha, TNF alpha), after stimulation with phorbol myristic acid (PMA)
注意事項 該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液。
保藏機構(gòu) ATCC; CRL-1593ATCC; CRL-1593.2 DSMZ; ACC-5 ECACC; 85011440
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
dCTP 溶液,2.5mM2mL 鈣蛋白酶抑制劑Ⅰ溶液,10mg/mL10mL
dCTP 溶液,100mM0.5mL 改良 Lowry 法蛋白定量試劑盒1000 次
Deaza dGTP0.4mL 福林酚試劑100mL
雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4 糞便 DNAout30 次
dNTP 和引物清除劑100 次 糞便 DNAout100 次
大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)elisa檢測試劑盒
大鼠Ⅵ型膠原(Col Ⅵ)elisa檢測試劑盒
大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)elisa檢測試劑盒
大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠Ⅴ型膠原(Col Ⅴ)elisa檢測試劑盒
U-937 (組織細胞淋巴瘤細胞)大鼠P27蛋白(P27)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠P53(P53)elisa分析檢測試劑盒
大鼠P53(P53)elisa檢測試劑盒
大鼠P53elisa檢測試劑盒
大鼠p53上調(diào)凋亡調(diào)節(jié)因子(PUMA)elisa檢測試劑盒
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。