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SF767 (腦瘤細(xì)胞)

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更新時(shí)間:2022-04-02 15:43:15瀏覽次數(shù):168

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X0434 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研使用    
SF767 (腦瘤細(xì)胞)公司其它各種產(chǎn)品未知糖基化轉(zhuǎn)移酶AER61抗體 指甲髕骨綜合征相關(guān)蛋白NPS1抗體
錨蛋白重復(fù)域5抗體 指(趾)關(guān)節(jié)粘連NOG蛋白抗體
腦通道蛋白2抗體 植物延長(zhǎng)蛋白(擬南芥)
腦通道蛋白4抗體 植物延展素-β
小腸通道蛋白5抗體 植物生長(zhǎng)激素ABP1抗體

詳細(xì)介紹

培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3.
6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi);
1.
細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

SF767 (腦瘤細(xì)胞)

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號(hào)

GOY-01X0434

名稱(chēng)    SF767 (腦瘤細(xì)胞)
別稱(chēng) SF-767; SF 767

年齡(性別) 66

組織來(lái)源 腦組織

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 多角形

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 MEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3/

倍增時(shí)間 ~29-36 hours

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

溫度:37

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
1
、無(wú)菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
2
、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3
、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4
、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5
、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1
、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2
、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3
、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4
、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5
、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6
、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
RNA 級(jí) SDS( 十二烷基硫酸 )100g  真菌種屬鑒定 PCR Mix 4100

RNA 級(jí) Tris Base( 三羥甲基氨基 )100g  真菌種屬鑒定 PCR Mix 3100

剪切式勻漿機(jī)1臺(tái)  真菌種屬鑒定 PCR Mix 2100

1μL 超微量分光光度計(jì)1個(gè)  真菌種屬鑒定 PCR Mix 1100

帶柄尼龍篩1個(gè)  真菌 RNAout50
FITC
標(biāo)記的脂肪甘油三酯脂酶抗體

FITC標(biāo)記的細(xì)胞衰老相關(guān)蛋白ASF1A抗體

FITC標(biāo)記的跨膜蛋白16A/鈣激活氯離子通道抗體

FITC標(biāo)記的淀粉樣肽前體蛋白抗體(C端)

FITC標(biāo)記的雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體
SF767 (
腦瘤細(xì)胞)大鼠淀粉樣蛋白β前體蛋白結(jié)合蛋白B3(APBB3)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠淀粉樣前體蛋白(APP)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠淀粉樣前體蛋白(βAPP)elisa分析檢測(cè)試劑盒

大鼠淀粉樣前體蛋白(βAPP)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)elisa檢測(cè)試劑盒

冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(shí)(或隔夜)液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。


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