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C2C12 (小鼠成肌細胞)

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  • 所在地 上海市

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更新時間:2022-04-06 10:23:29瀏覽次數(shù):196

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0044 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研使用    
C2C12 (小鼠成肌細胞)公司其它各種產(chǎn)品T淋巴細胞CD1抗體 纖維連接蛋白抗體
透明質(zhì)酸介導(dǎo)細胞游走受體抗體 纖維蛋白原抗體
CUE結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 纖維蛋白原單克隆抗體
腫瘤/抗原1B 纖維蛋白原γ鏈抗體
轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體 纖維蛋白原β鏈抗體

詳細介紹

培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2
)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3.
6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

圖片13.jpg

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

C2C12 (小鼠成肌細胞)

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X0044

名稱    C2C12 (小鼠成肌細胞) (種屬鑒定正確)
別稱 C2c12; C2-C12; C12

種屬 小鼠

年齡(性別) 不詳

組織來源 骨骼??;品系:C3H

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 成肌細胞樣

背景描述 C2C12細胞是由D·YaffeO·Saxel建立的小鼠成肌細胞株的亞克?。?/span>C2C12細胞分化很快,形成可伸縮的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白2(BMP-2)處理C2C12細胞,會導(dǎo)致C2C12細胞的分化途徑從成肌細胞轉(zhuǎn)換為成骨細胞。檢測表明,C2C12細胞肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 DMEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3/

倍增時間 ~20小時

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO25%

溫度:37

注意事項 該細胞貼壁松散,操作時請盡量輕柔;換液時需預(yù)熱培養(yǎng)基;收貨如有大塊脫落的細胞團,為正常現(xiàn)象,請按照收貨注意事項處理。

保藏機構(gòu) ATCC; CRL-1772 BCRC; 60083 BCRJ; 0058 DSMZ; ACC-565

實驗報告:
產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
1
、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
2
、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3
、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4
、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5
、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1
、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2
、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
3
PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min
4
、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
5
PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6
、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
遲緩愛德華氏菌   醋酸醋桿菌

陰溝腸桿菌   洛格酵母

白腐菌   改良馬丁培養(yǎng)基100ml

深黃被孢霉   沙門氏菌IV

蘇云金芽胞桿菌柏氏變種Bacillusthuringiensisvar.berliner   惡臭假單胞菌
HEPES
緩沖液1M 500ml

10×TBE緩沖液 500ml

50×TAE緩沖液 500ml

5×Tris-Glycine緩沖液 500ml

10×MOPS緩沖液  500ml
C2C12 (
小鼠成肌細胞)大鼠磷酸化胰島素受體(pISR1)elisa檢測試劑盒

大鼠磷酸化乙酰A羧化酶(pACCase)elisa檢測試劑盒

大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)elisa檢測試劑盒

大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)elisa檢測試劑盒免費代測

大鼠磷酸肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)elisa檢測試劑盒

冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。


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