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大鼠胸腺淋巴細(xì)胞

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更新時間:2022-04-13 09:17:29瀏覽次數(shù):216

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X1128 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研使用    
大鼠胸腺淋巴細(xì)胞公司其它各種產(chǎn)品致盲基因LCA5樣蛋白抗體 泛素特異性28抗體
大腦邊緣系統(tǒng)相關(guān)膜蛋白抗體 泛素特異性1抗體
神經(jīng)突觸粘附樣分子1抗體 泛素羧基末端水解酶5互相作用蛋白1抗體
富含重復(fù)序列/Ⅲ型纖維連接蛋白4抗體 泛素融合降解樣蛋白1抗體
層粘蛋白α4抗體(Lamininα4) 泛素硫酯酶L3抗體

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

大鼠胸腺淋巴細(xì)胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X1128

名稱    大鼠胸腺淋巴細(xì)胞
2.組織來源:胸腺組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介:

大鼠胸腺淋巴細(xì)胞分離自胸腺組織;胸腺是機(jī)體的重要淋巴器官,其功能與免疫緊密相關(guān),是T細(xì)胞分化、發(fā)育、成熟的場所。其還可以分泌胸腺激素及激素類物質(zhì),具內(nèi)分泌機(jī)能的器官。位于胸腔前縱隔。胚胎后期及初生時,是一生中重量相對大的時期。隨年齡增長,胸腺繼續(xù)發(fā)育;此后胸腺逐漸退化,淋巴細(xì)胞減少,脂肪組織增多。胸腺的結(jié)構(gòu)表面有結(jié)締組織被膜,結(jié)締組織伸入胸腺實質(zhì)把胸腺分成許多不*分隔的小葉。小葉周邊為皮質(zhì),深部為髓質(zhì)。皮質(zhì)不*包圍髓質(zhì),相鄰小葉髓質(zhì)彼此銜接。皮質(zhì)主要由淋巴細(xì)胞和上皮性網(wǎng)狀細(xì)胞構(gòu)成,胞質(zhì)中有顆粒及泡狀結(jié)構(gòu)。網(wǎng)狀細(xì)胞間有密集的淋巴細(xì)胞。胸腺的淋巴細(xì)胞又稱為胸腺細(xì)胞,在皮質(zhì)淺層細(xì)胞較大,為較原始的淋巴細(xì)胞。中層為中等大小的淋巴細(xì)胞,深層為小淋巴細(xì)胞。從淺層到深層為造血干細(xì)胞增殖分化為小淋巴細(xì)胞的過程。皮質(zhì)內(nèi)還有巨噬細(xì)胞,無淋巴小結(jié)。髓質(zhì)中淋巴細(xì)胞少而稀疏,上皮性網(wǎng)狀細(xì)胞多而顯著。形態(tài)多樣,胞質(zhì)中有顆粒及泡狀結(jié)構(gòu),為其分泌物,尚有散在的圓形的胸腺小體。

5.方法簡介:

公司實驗室分離的大鼠胸腺淋巴細(xì)胞采用機(jī)械研磨法結(jié)合密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為1×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的大鼠胸腺淋巴細(xì)胞經(jīng)過檢測,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 懸浮

細(xì)胞形態(tài) 圓形

傳代特性 不增殖;不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

圖片13.jpg

冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3.
6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
實驗報告:
產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
1
、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將成1mm3左右大小;
2
、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3
、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4
、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5
、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1
、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2
、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
3
、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min
4
、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5
、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6
、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
擬康氏木霉   產(chǎn)酸克雷伯氏菌

屎腸球菌凍干粉   短裙竹蓀東北變種

溶藻細(xì)菌   清酒酵母

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae   德巴利酵母 Debaryomyces occidentalis

玫煙色擬青霉   梭形芽胞桿菌 Bacillus fusiformis
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