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小鼠腸微血管內(nèi)皮細胞

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更新時間:2022-04-13 10:30:12瀏覽次數(shù):183

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X1196 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研使用    
小鼠腸微血管內(nèi)皮細胞公司其它各種產(chǎn)品黑色素瘤相關(guān)抗原B6抗體 成纖維細胞生長因子23抗體
黑色素瘤相關(guān)抗原B2抗體 成纖維細胞生長因子22抗體
黑色素瘤相關(guān)抗原B4抗體 成纖維細胞生長因子21抗體
黑色素瘤相關(guān)抗原C1抗體 成纖維細胞生長因子20抗體
組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶抗體(腦膜瘤表達抗原5) 成纖維細胞生長因子19抗體

詳細介紹

培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2
)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3.
6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

圖片13.jpg

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

小鼠腸微血管內(nèi)皮細胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X1196

名稱    小鼠腸微血管內(nèi)皮細胞
2.組織來源:腸組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

小鼠腸微血管內(nèi)皮細胞分離自腸道組織;腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中長的一段,也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,形成糞便,再通過直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。微血管是極細微的血管,管徑平均為6-9μm,連于動、靜脈之間,互相連接成網(wǎng)狀。微血管壁薄,管徑較小,血流很慢,通透性大。其功能是利于血液與組織之間進行物質(zhì)交換。其管壁主要由一層內(nèi)皮細胞構(gòu)成,在內(nèi)皮外面有一薄層結(jié)締組織。另外還常可見到一種扁而有突起的細胞貼在微血管的管壁外面,稱為周細胞。

5.方法簡介:

公司實驗室分離的小鼠腸微血管內(nèi)皮細胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的小鼠腸微血管內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

實驗報告:
產(chǎn)品僅用于科研一、分離與培養(yǎng):
1
、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將成1mm3左右大小;
2
、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3
、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4
、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5
、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1
、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min
2
、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3
PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min
4
、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
5
、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6
、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
人蒼白桿菌   伊氏李斯特氏菌

白色念珠菌AS2.2086凍干粉   蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

熒光威克酵母   淡紫青霉

登佐鏈霉菌   假芝

嗜熱脂肪芽孢桿菌凍干粉   呂宋馬杜拉 Actinomadura luzonensis
甘油三酯(TG)含量測試盒

羥(HYP)測試盒

羥(HYP)測試盒

丙酮酸(PA)含量測試盒

丙酮酸(PA)含量測試盒
小鼠腸微血管內(nèi)皮細胞人血栓素B2TXB2elisa檢測試劑盒

人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TMelisa檢測試劑盒

人血小板生成素(TPOelisa檢測試劑盒

人血小板衍化生長因子(PDGF-BBelisa檢測試劑盒

人血小板衍化生長因子-BBPDGF-BBelisa檢測試劑盒

冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。


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