詳細介紹
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1295 |
名稱 大鼠睪丸間質(zhì)細胞
2.組織來源:組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:
大鼠間質(zhì)細胞分離自組織;間質(zhì)細胞成群分布在曲精小管之間,胞體呈圓形,橢圓形或不規(guī)則形,胞體較大,直徑約20μm,胞質(zhì)呈嗜酸性,細胞核呈圓形或卵圓形,常位于中央,染色較淡,有1~2個核仁線粒體多,呈管嵴狀,無分泌顆粒。從青春期開始,間質(zhì)細胞受垂體前葉嗜堿性細胞分泌的間質(zhì)細胞刺激素(黃體生成素)的作用,能合成分泌雄性激素,可促進的發(fā)生和男性生殖器官發(fā)育,以及維持第二性征和性功能。
5.方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠間質(zhì)細胞采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠間質(zhì)細胞經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
鼠傷 少動鞘氨醇單胞菌
日勾維腸桿菌 表面培養(yǎng)基60mm/25cm2
田菁根瘤菌 光孢短柄帚霉
金耳、黃木耳 成團腸桿菌(成團泛菌)
尖鱗黃傘 田菁根瘤菌 Azorhizobium canlinodans
牛N端前腦鈉素(NT-proBNP)elisa檢測試劑盒免費代測
牛D-乳酸elisa檢測試劑盒
牛C肽(C-Peptide)elisa檢測試劑盒
牛C反應蛋白(CRP)elisa檢測試劑盒
牛5羥色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠睪丸間質(zhì)細胞小鼠A類清道夫受體3(SCARA3)elisa檢測試劑盒
小鼠Bcl2關聯(lián)X蛋白(Bax)elisa檢測試劑盒
小鼠Bcl-2相關X蛋白(BAX)elisa分析檢測試劑盒
小鼠Bcl-2相關X蛋白(BAX)elisa檢測試劑盒
小鼠Bcl2相關髓細胞白血病序列1(MCL1)elisa檢測試劑盒
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