恒河猴腎細(xì)胞；RM-1說明書【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱恒河猴腎細(xì)胞；RM-1說明書
形態(tài)特性  上皮樣，多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞系來源于一獼猴的腎組織。1982年由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院昆明醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所建立。 
培養(yǎng)條件  M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS)  15%NBS
傳代方法  1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 P6
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 B類

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

ARPE-19(人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
芽孢桿菌屬 Bacillus sp.
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
Poly-D-lysine溶液規(guī)格：2mggersion
粘紅酵母 Rhodotorula glutinis
黑木耳 Auricularia auricula
中國倉鼠肺細(xì)胞英文名稱：CHL
小鼠腸上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
平山正青霉 Eupenicillium hirayamae
費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
NAMALWA(人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
沙地青霉 Penicillium arenicola
草菇 Volvariella bombycina
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞英文名稱：3T3A31
大鼠尿道上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
土曲霉 Aspergillus terreus
抗生鏈霉菌 Streptomyces antibioticus
Li-7(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus
金頂側(cè)耳 Pleurotus citrinopileatusBromoform    三溴烷    75-25-2
GENTIOBIOSE    龍膽二糖    554-91-6
1,6-Diisocyanatohexane    1,6-己二異酸酯    822-06-0
(S)-(-)-2-Azetidinecarboxylic acid    (S)-(-)-2-羧基環(huán)丁胺    2133-34-8
Trichloroacetonitrile    三乙    545-06-2
PALMITIC ACID SODIUM SALT    棕櫚酸    408-35-5
TAPSO    N-三(羥基)氨基-2-羥基丙磺酸    68399-81-5
3-Methoxyphenol    3-氧基酚    150-19-6
O-Benzyl-L-tyrosine methyl ester hydrochloride    O-芐基-L-酪氨酸酯酸    34805-17-9
Hyaluronic acid    透明質(zhì)酸    9004-61-9
Sodium p-styrenesulfonate    對(duì)乙磺酸    2695-37-6
Zinc nitrate    酸鋅    7779-88-6
Dichloro(1,5-cyclooctadiene)platinum(II)    (1,5-環(huán)二)二化鉑(II)    12080-32-9
Copper sulfate pentahydrate    硫酸銅，五水    7758-99-8
Dichloroethane    二乙烷    1300-21-6
Sodium dithionite    連二亞硫酸    7775-14-6
3-Ethoxyaniline    間氨基    621-33-0
thiosemicarbazide    硫代氨基脲    79-19-6
p-Nitrobenzamide    對(duì)基酰胺    619-80-7
Tryptic Soy Broth with Yeast Extract    胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯（TSB-YE）    
5-Bromo-4,6-dichloropyrimidine    5-溴-4,6-二嘧啶    68797-61-5
Acid Black 2    色素(水溶)    8005/3/6
Trichloroethanol    2,2,2-三乙醇    115-20-8