非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A；Vero-HCV-NS5A價格質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A；Vero-HCV-NS5A價格操作步驟：

1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  Vero-HCV-NS5A細胞整合有丙型肝炎病毒的NS5A基因，能穩(wěn)定表達NS5A蛋白，是HCV基礎研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室郭佳博士于2008年構建并保存。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C35
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權限 A類

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

曲霉屬 Aspergillus sp.
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
DLD-1(人結(jié)腸腺細胞)5×106cells/瓶×2
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
莢膜放線桿菌 Actinobacillus capsulatus
EDTA Buffer(50x)/EDTA 緩沖液(IHC抗原修復液, 50x)100ml國產(chǎn)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
燼灰吸水鏈霉菌 Streptomyces cinereohygroscopicus
倉鼠腎成纖維細胞英文名稱：BHK-21 [C-13]
宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.
側(cè)耳 Pleurotus sp.
細胞周期與細胞凋亡檢測試劑盒規(guī)格：50次
293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細胞系
煙曲霉 Aspergillus fumigatus
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
LLC-MK2(恒河猴腎細胞)5×106cells/瓶×2
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
梭形芽胞桿菌 Bacillus fusiformis
HCG803全細胞裂解液100ug100ug
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae0.5mLDNA 離心超濾管 (300-500 KD)    120668E-1    1個
25mL    四甲基乙二胺    
5次    大提柱式動物 RNAout    
100g    瓊脂糖    
500U    堿性磷酸酶，偶聯(lián)    
PvuII    17-0190    1000U
暗盒 (5×7 英寸 )    120609A-1    1個
5g    苔素    
1g    多聚半乳糖醛    
25 次    動物細胞核蛋白微量制備試劑盒    
200U    Dicer(RNase III)    
Western 雜交技術服務    P002-1    1 張膜
UTP 溶液，2.5mM    131217-2    2mL
2mL    無包被磁珠    
1mL    GS115 酵母種    
25mg    可溶性兩性 B    
2mL    dGTP 溶液，2.5mM    
纖維二糖    CAS528-50-7    5g
Rosetta 感受態(tài)細胞    140379-10    10×100μL
200mL    小鼠中性粒細胞分離液 1.100    
100 次    海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒