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猴胎腎細(xì)胞;MARC145/Gal-8說明書

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更新時(shí)間:2017-01-23 14:55:55瀏覽次數(shù):295

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

猴胎腎細(xì)胞;MARC145/Gal-8說明書售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

猴胎腎細(xì)胞;MARC145/Gal-8說明書【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱 猴胎腎細(xì)胞;MARC145/Gal-8說明書
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii
SW 982(人滑膜肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
粗柄羊肚菌 Morchella crassipas
人小腦顆粒細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
PANC-1, 人胰腺細(xì)胞 Human
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
Caki-1(人腎透細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
爪哇根霉 Rhizopus javanicus
微黃八疊球菌 Sarcina subflava
D283 Med(人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
鏈輪枝菌 Streptoverticillium sp.
Western 中分子量蛋白marker20次國產(chǎn)
暫無 Penicillium sclerotigenum
漏斗狀側(cè)耳 Pleurotus sajor-caju
腎英文名稱:A498
人絨毛膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞
香菇 Lentinula edodes
BABL/C小鼠胚胎細(xì)胞英文名稱:BABL/C2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae青 G 鹽溶液 ,200mg/mL    120697-1    1 Mu
5mL    抑氨肽酶,5mg/mL    
1g    精胺    
100mL    二甲基亞砜    
100μL    即用型 GFP 標(biāo)簽蛋白裂解液    
聚乙二醇 12000    CAS25322-68-3    250g
Protein A 瓊脂糖    130418-1    1mL
5g    中性紅    
50 次    LAMP 擴(kuò)增陽性對(duì)照    
100mg    膠原酶Ⅱ型    
20 次    細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V-APC)    
鏈親和素    CAS9013-20-1    0.1mg
蛋白質(zhì)電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3.3-20.1KD)    70102A-15    15 次
1mL    組織培養(yǎng)基蛋白酶抑制劑    
100g    氯化    
100mL    瓊脂糖凝膠 2B    
100 T    過氧化氫酶測(cè)試盒 ( 可見光比色法 )    
磷脂酶 A2    CAS9001-84-7    1mg
玻璃勻漿器 ,2mL    101103B-1    1套
柱式真 RNAout    80804-50    50 次
100mL    NP-40 裂解液    

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