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詳細(xì)介紹
非洲綠猴腎細(xì)胞；VERO價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
非洲綠猴腎細(xì)胞；VERO價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣，多角形
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 Vero細(xì)胞株是日本千葉大學(xué)的Yasumura Y和Kawakita Y從正常成年非洲綠猴的腎臟組織中分離建立的。該細(xì)胞常作為轉(zhuǎn)染宿主，用于支原體的檢測(cè)。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 PN3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體 54-61
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
小鼠表皮黑色素細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
彎曲桿菌 Lactobacillus curvatus
香菇 Lentinula edodes
BEL-7402(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
短桿菌屬 Brevibacterium sp.
根瘤菌
SP Rabbit HRP Kit(DAB)/兔Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國(guó)產(chǎn)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
香菇 Lentinula edodes
人胎盤絨毛細(xì)胞英文名稱：JAR
Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 Mouse
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 Yersinia enterocolitica
串珠鐮孢 Fusarium moniliforme
馬松(Masson)三色法染色試劑盒規(guī)格：500ml
NSC，大鼠神經(jīng)干細(xì)胞 Rattus
異常漢遜酵母 Hansenula anomala
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
MDA-MB-157(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
6nt 隨機(jī)引物，0.5μg/μL 100409-5 5μg
100mL Western 印跡膜封膜液 ( 尼龍膜 )
250 T 過氧化氫定量分析試劑盒 ( 水兼容性 )
5g 戊巴比妥
250 mL Lillie 甲醛中性固定液
L- 色氨酸 CAS73-22-3 5g
F12 培養(yǎng)基 ( 含 10% 胎牛血清 ) 19-0060-100 100mL
柱式血液 DNAout 60306-200 200 次
5g 氫化可
1g D- 生物素 ( 維生素 H)
2μg 質(zhì)粒 ( 載體 ) 系列產(chǎn)品
100mL 增強(qiáng)型天狼猩紅染色試劑盒
一氧化氮合成酶測(cè)試盒 18-0610-24 24 T
超快核酸銀染試劑盒 81104-1000 1000mL
4mg 神經(jīng)氨酸酶 ( 梭 )
10mL DNA 堿性膠上樣液 ,6×
200mL Bradford 法蛋白定量試劑盒
10 次 克必隆 eTS miRNA RT-PCR 試劑盒
甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶 130644-500 500U
生物素標(biāo)記 dUTP 溶液 100920-50 50μL
1000U Taq 酶抗體
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