水牛皮膚成纖維樣細胞；WB-S2價格質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

水牛皮膚成纖維樣細胞；WB-S2價格操作步驟：

1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞系來源于一雄性河川型水牛的耳部皮膚組織，2010年由中科院昆明細胞庫建立。 
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法  1:2傳代；3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

NCI-H205(人腎上腺腺瘤細胞)    5×106cells/瓶×2            
NEC(人食管細胞)    5×106cells/瓶×2    gersion        
A-498(人腎細胞)    5×106cells/瓶×2            
LTEP-a-2(人肺腺細胞)    5×106cells/瓶×2            
HT-29(人結(jié)腸細胞)    5×106cells/瓶×2            
HCT-15(人結(jié)腸細胞)    5×106cells/瓶×2            
中分子量單一蛋白Marker（35 kD）    50次        國產(chǎn)    
Caov-3(人突狀卵巢腺細胞)    5×106cells/瓶×2            
人主動脈內(nèi)細胞*培養(yǎng)基    100mL            
指示選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)    炭疽桿菌的分離鑒別    國產(chǎn)/進口    250克    
Caco-2(人結(jié)直腸腺細胞)    5×106cells/瓶×2            
甘氨酸    500g        國產(chǎn)    
敘利亞倉鼠腎細胞    英文名稱：        BHK-21    
C2C12, 小鼠肌原細胞                
小鼠肝動脈內(nèi)細胞*培養(yǎng)基    100mL            
蟾毒靈    規(guī)格：        20mg/支；98%    
人咽鱗細胞    英文名稱：        FaDu    
HAT混合鹽/HAT Media Supplement (50×) Hybri-Max™    γ射線滅菌    SigmaH0262原裝    1vail    
人胚肺成纖維樣細胞（男）    英文名稱：        HEL1    
YM肉湯/YM Broth    BR    國產(chǎn)/進口    250克    
人非小細胞肺細胞    英文名稱：        HCC827   50 次    雙染細胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 647·7-AAD）    
48 管    DTT，免稱量蛋白    
200 次    微量樣品核酸提取試劑盒    
2mL    鏈霉親和素磁珠    
BAL31 核酸酶    120409-50    50U
一站式平末端克隆試劑盒    131126-20    20 次
10 次    一站式 RNA 電泳套裝    
10 次    克必隆 RACE 試劑盒    
100mg    鮭魚精 DNA    
5mL    動物上皮細胞生長因子    
50mL    DNA  2-Mercaptoethanol(2- 乙醇 )    
雙染細胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V- 熒光素 555·7-AAD）    140629-50    50 次
Southern Marker DL2000(DIG)    120654D-20    20 次
30 次    石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒    
100 次    動物細胞核蛋白微量制備試劑盒    
1g    溶酶    
250mg    胃蛋白酶    
氯化鎂六水    CAS7791-18-6    100g
木瓜蛋白酶抑制劑溶液，0.5 mg/mL    130533-10    10mL
50 次    柱式尿液 DNAout    
500 次    MTT 檢測試劑盒    
0.25mL    ATP 溶液，100mM