詳細介紹
兔主動脈平滑肌細胞;SMC價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
兔主動脈平滑肌細胞;SMC價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性 多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞來源于兔主動脈,常用作動脈粥樣硬化的研究。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P10
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 40~44
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
穿心蓮內(nèi)酯 分子式: 350.4492 分子量: C20H30O5 英文名稱: Andrographolide CAS號: 5508-58-7
酸性橙74 分子式: 441.35 分子量: C16H12N5NaO7S 英文名稱: Acid orange 74 CAS號: 10127-27-2
酸性媒介橙R 分子式: 分子量: 英文名稱: Acid medium orange R CAS號: VDDSV
酸性藍BGA 分子式: 分子量: 英文名稱: Acid blue BGA CAS號:
次甲基藍 分子式: 373.9 分子量: C16H18ClN3S·3H2O 英文名稱: Methylene blue CAS號: 7220-79-3
異丁酸納 分子式: 分子量: 英文名稱: ISO butyrate CAS號: 996-30-5
3-苯甲基-5-(2-羥基乙基)-4-甲基噻唑啉氯 分子式: 269.79 分子量: C13H16ClNOS 英文名稱: 3- -5- (2- hydroxy ethyl benzene methyl) -4- methyl thiazole chloride CAS號: 4568-71-2
磷鉬酸 分子式: 1861.43(無水計) 分子量: H7〔P(Mo2O7)6〕·XH2O 英文名稱: Phosphomolybdic acid CAS號: 51429-74-4
芐橙 分子式: 801.78 分子量: C35H25N5Na2O9S3 英文名稱: Benzyl orange CAS號: 2429-80-3
5KU β- 半乳糖苷酶
50 T 丙二醛測試盒 / 脂質(zhì)過氧化物測試盒
膠原酶Ⅳ型 CAS9001-12-1 100mg
兔抗雞 IgY,辣根過氧化物酶標(biāo)記 131152-300 300μL
柱式軟骨 RNAout 101121-50 50 次
1g n- 基 -β-D- 吡喃葡萄糖苷
1個 4mL DNA 離心超濾管 (90-150 KD)
5mL 上皮細胞生長因子 -2
1.5mL DNA 尿素 -PAGE 上樣液
少突膠質(zhì)細胞生長因子 21-0340-5 5mL
RNA Guanidium HCl ( 鹽酸胍 ) 101224-100 100g
1mg PMA/TPA (PKC 激活劑 )
1mL BJ5183 種
5mg L-NMMA( 總 NOS 抑制劑 )
500 次 MTT 檢測試劑盒
LY294002(PI3K 抑制劑 ) 23-0460-1 1mg
一管式植物 DNAout 60705-500 500 次
100g RNA PVP K30( 聚乙烯基吡咯烷酮 K30)
12x50nm Cyanine 3-NHS Ester
50 次 加 T 試劑盒
1個 15mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)
Hoechst33342 干粉 130865-10 10mg