詳細(xì)介紹
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。?;CHO-HCV-NS4A價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買(mǎi)到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以?xún)?nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克?。籆HO-HCV-NS4A價(jià)格操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 CHO-HCV-NS4A細(xì)胞整合有丙型肝炎病毒的NS4A基因,能穩(wěn)定表達(dá)NS4A蛋白,是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室郭佳博士于2008年構(gòu)建并保存。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C20
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
PHENYLTRIALLYLSILANE 分子式: 228.4 分子量: C15H20Si 英文名稱(chēng): PHENYLTRIALLYLSILANE CAS號(hào): 2633-57-0
泛昔洛韋 分子式: 321.33 分子量: C14H19N5O4 英文名稱(chēng): Famciclovir CAS號(hào): 104227-87-4
芐基三苯基氯化膦 分子式: 388.87 分子量: C25H22ClP 英文名稱(chēng): Benzyl three phenyl chloride CAS號(hào): 1100-88-5
裨士麥棕Y 分子式: 分子量: 英文名稱(chēng): New Smyrna brown Y CAS號(hào):
鉻藍(lán)黑R 分子式: 416.39 分子量: C20H13N2NaO5S 英文名稱(chēng): Chrome blue black R CAS號(hào): 2538-85-4
細(xì)胞染色劑黃綠素-AM 分子式: 994.857 分子量: C46H46N2O23 英文名稱(chēng): Cell stain calcein -AM CAS號(hào): 148504-34-1
醌茜隱色體 分子式: 242.23 分子量: C14H10O4 英文名稱(chēng): The color of the body CAS號(hào): 476-60-8
馬尿酸 分子式: 179.17 分子量: C9H9NO3 英文名稱(chēng): Iodohippurate CAS號(hào): 495-69-2
1-辛烯 分子式: 112.21 分子量: C8H16 英文名稱(chēng): 1- Sim CAS號(hào): 111-66-0
妥曲珠利砜 分子式: 457.38 分子量: C18H14F3N3O6S 英文名稱(chēng): Toltrazuril sulfone CAS號(hào): 69004-04-2
毛蕊異黃酮苷 分子式: 446.4 分子量: C22H22O10 英文名稱(chēng): The isoflavone glycosides CAS號(hào): 20633-67-4
諾孕美特 分子式: 372.55 分子量: C23H32O4 英文名稱(chēng): Norgestomet CAS號(hào): 25092-41-5 芥子酸 CAS530-59-6 1g
長(zhǎng)效期 SDS-PAGE 上樣液 100911-1 1mL
50 只 離心管 ( 配研磨杵用 )
1g 卵白蛋白
3000U 谷氨酸脫氫酶
100 T ROS 活性氧檢測(cè)試劑盒
膠原酶Ⅲ型 CAS9001-12-1 100mg
山羊抗人 IgG(H+L),辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記 131151-300 300μL
軟骨 RNAout 70401-50 50 次
1g n- 十二烷基 -β-D- 麥芽糖苷
1個(gè) 4mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)
5mL 上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子
100g 電泳尿素
少突膠質(zhì)前體細(xì)胞生長(zhǎng)因子 21-0330-5 5mL
RNA EDTA·2Na ( 乙二胺四二 ) 101223-100 100g
250 mL PLPD 固定液
500U BglII
200mg L-NAME(eNOS 抑制劑 )
50 次 端粒酶重復(fù)片段擴(kuò)增試劑盒 (TRAP)
LPS(TLR4 激活劑 ) 23-0450-0.5 0.5mg
一管式植物 DNAout 60705-50 50 次
25mg RNA Oligo(dT) 纖維素
25μL Cy5-dCTP 溶液,10mM