詳細(xì)介紹
抗人fusion單抗雜交瘤細(xì)胞;1F4E6A2圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 抗人fusion單抗雜交瘤細(xì)胞;1F4E6A2圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 可產(chǎn)生抗人fusion的單克隆抗體
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C30
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
[ANG-R-Tie1elisa試劑盒]規(guī)格型號:96T/48T關(guān)鍵詞:[ANG-R-Tie1試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
[AHAelisa試劑盒]規(guī)格型號:96T/48T關(guān)鍵詞:[AHA試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
[ADAMTS4elisa試劑盒]規(guī)格型號:96T/48T關(guān)鍵詞:[ADAMTS4試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
[6-OHDAelisa試劑盒]規(guī)格型號:96T/48T關(guān)鍵詞:[6-OHDA試劑盒ELISA] 用于定量檢測血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人骨髓抑制1(MPIF-1/CCL23)的含量。保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
豬腸三葉試劑盒規(guī)格型號:96T/48T豬腸三葉試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬腸三葉試劑盒、豬腸三葉elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
豬超氧化物歧化酶試劑盒規(guī)格型號:96T/48T豬超氧化物歧化酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬超氧化物歧化酶試劑盒、豬超氧化物歧化酶elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
大鼠白三C4試劑盒規(guī)格型號:96T/48T大鼠白三C4試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:大鼠白三C4試劑盒、大鼠白三C4 elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔誘導(dǎo)型NO合酶試劑盒規(guī)格型號:96T/48T兔誘導(dǎo)型NO合酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔誘導(dǎo)型NO合酶試劑盒、兔誘導(dǎo)型NO合酶elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。
綿羊磷化腺苷活化激酶試劑盒規(guī)格型號:96T/48T綿羊磷化腺苷活化激酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:綿羊磷化腺苷活化激酶試劑盒、綿羊磷化腺苷活化激酶elisa試劑盒保存條件:2-8℃保質(zhì)期:6個(gè)月。玻璃勻漿器 ,2mL 1套 101103B-1
柱式真菌 RNAout 50 次 80804-50
100mL NP-40 裂解液
1g 6- 芐基氨基嘌呤
100mg Acridine Orange(AO)
10mL 長效期 SDS-PAGE 還原劑
Calcein 100mg 22-0090-100
200 μL RNase-free 黃吸頭 ( 袋裝 ) 1000 支 17-014-1000
500g 硼酸
25g 巴比妥
100μg Rapamycin(FRAP/mTOR 抑制劑 )
5000U SP6 RNA 聚合酶
S-Methyl-ITU.sulfate(iN0S 抑制劑 ) 50mg 23-0670-50
柱式植物 mtDNAout,測序 10 次 130944-10
100mL RNase-free PVP K30 溶液 ,20%
1000mL 超快核酸銀染試劑盒
100mL RNase-free EDTA 溶液 ,0.5M,pH 8.0
10mL 土鹽溶液 ,100mg/mL
Catalase( 抗氧化酶 ) 200 mg 18-0040-200
DNA SDS 溶液,10% 100mL 101201-100
50 次 SP6 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒