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詳細(xì)介紹
雜交瘤細(xì)胞株；FABP 4A8圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞株；FABP 4A8圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
PCMT1 天門冬氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶PCMT抗體規(guī)格: 0.2ml
Neurocan 神經(jīng)粘蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
Neurexin 1 軸突蛋白1(Neurexin 1α)抗體規(guī)格: 0.2ml
SCHIP1/IQCJ IQCJ抗體規(guī)格: 0.1ml
MTLR 胃動(dòng)素受體抗體規(guī)格: 0.1ml
C22orf25 22號(hào)染色體開放閱讀框25抗體規(guī)格: 0.2ml
SynCAM 細(xì)胞粘附分子1抗體規(guī)格: 0.1ml
MLC3F/MYL1/3 肌球蛋白輕鏈1/3抗體規(guī)格: 0.2ml
HEBP1/p22HBP 血紅素結(jié)合蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
CD45/B220 白細(xì)胞共同抗原抗體規(guī)格: 0.1ml
MASP 甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨酸肽酶1抗體規(guī)格: 0.2ml
C1orf180/AIDA 1號(hào)染色體開放閱讀框80抗體規(guī)格: 0.2ml
MMP9 基質(zhì)金屬蛋白酶9抗體 0.1ml
LY-86/MD-1 MD-1蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml
JWA JWA蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
ACADM/MCAD 酰基輔酶A脫氫酶中鏈抗體 0.2ml
LASS6 壽相關(guān)基因lASS6抗體規(guī)格: 0.2ml
C17orf49 17號(hào)染色體開放閱讀框49抗體規(guī)格: 0.2ml
A2AR/Adenosine A2a receptor 腺苷A2A受體抗體 0.1ml200mL 大鼠中性粒細(xì)胞分離液 1.091
鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶測試盒 24 T 18-0250-24
無內(nèi)毒素槍頭，1 mL 1盒 130503-96
100g 三 ( 羥甲基 ) 氨基甲烷
50 次 DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (300-10000 bp)
50 次 柱式細(xì)菌 RNAout
1mL XL-10 gold 菌種
Klenow 片段 200U 131015-200
miRNA PAGE 膠回收試劑盒 40 次 70604-40
1mL 羧芐青溶液 ,50mg/mL
24 次 單細(xì)胞全轉(zhuǎn)錄組擴(kuò)增試劑盒
30 次 一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 低 pH)
30μL 組蛋白 3.1 小鼠單抗
Lambda 核酸外切酶 1000U 130628-1000
甜菜堿溶液，5M，PCR 1.5mL 70902-1.5
150 次 天凈沙甲基化 PCR 2.0 試劑盒
1mL EHA103 農(nóng)桿菌菌種
100mL 一管式 TMB 顯色液 B ( 沉淀型 )
20 次 DNA 磷酸化試劑盒
N- 乙酰 -D- 氨基葡萄糖 5g CAS7512-17-6
魚類種屬鑒定 PCR Mix 100 次 131128J-100
1mL XL-10 gold 菌種
500UN 甘油醛 -3- 磷酸脫氫酶
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