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詳細(xì)介紹
分泌抗豬SC蛋白單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株；4H11圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 分泌抗豬SC蛋白單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株；4H11圖片
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
Tricine 干粉，電泳 100g
DNA 修復(fù)混合液 150 次
131089-1 R- 藻紅蛋白標(biāo)記親和素 1mg
90708-9 即用型高保真 PCR 試劑盒 9mL
脫氧膽酸 10g
放線酮 100mg
四甲基乙二胺 25mL
T4 RNA 連接酶 2( 截短型 K227Q) 2000U
CAS9087-70-1 抑肽酶 2mg
120514-20 即用型藍(lán)白 T 載體 D 型 ( 無(wú)啟動(dòng)子，有 MCS) 20 次
苷脫氨酶 250U
固藍(lán) BB 鹽 5g
固綠 5g
接頭 DNA(Sal I-Sma I) 5nmol
CAS9004-54-0 葡聚糖 T-2000 10g
12-131 Rosetta-gami(DE3)plysS 菌種 1mL
液相內(nèi)毒素清除劑 500 次
JM109(DE3) 菌種 1mL
L- 阿拉伯糖 10g
DNA 包被溶液 100mL
CAS636-00-0 6- 羥基多巴胺 5g
120701-10 鏈脲佐菌素溶液 ,10mg/mL 10mL
吲哚 -3- 1g
聚乙二醇 6000 250g KB(人口腔表樣細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HeLa/宮頸細(xì)胞株國(guó)產(chǎn)
中性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
Chang liver (CCL13) (人張氏肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠角膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
5637, 人膀胱細(xì)胞
人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
改良番茄汁培養(yǎng)基/改良番茄汁瓊脂/Tomato Juice Agar Modified食品中酸菌總數(shù)測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
NCI-H2170(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
人支氣管成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
細(xì)胞名稱
人胰腺上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
EF-18瓊脂/EF-18 Agar濾膜法檢測(cè)食品中沙門(mén)氏菌250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人臍動(dòng)脈內(nèi)細(xì)胞
VRBG瓊脂/結(jié)晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂/VRBGA/Violet Red Bile Glucose Agar/VRBG Agar奶粉中坂崎桿菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
假單胞F瓊脂/Pseudomonas Agar F銅綠（綠膿）假單胞菌色素生成試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠支氣管成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
葡萄球菌選擇性瓊脂/貝爾德-帕克瓊脂/Staphylococcus Selective Agar/Baird Parker Agar凝固酶陽(yáng)生葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
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