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鼠/人雜交瘤細(xì)胞系;Hybrid Liver cell GLH04圖片

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更新時(shí)間:2017-01-23 14:05:49瀏覽次數(shù):242

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鼠/人雜交瘤細(xì)胞系;Hybrid Liver cell GLH04圖片售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

鼠/人雜交瘤細(xì)胞系;Hybrid Liver cell GLH04圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細(xì)胞名稱 鼠/人雜交瘤細(xì)胞系;Hybrid Liver cell GLH04圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C8
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè),100%進(jìn)口來(lái)源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中,1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

IRF3  干擾素調(diào)節(jié)因子3    規(guī)格:0.1ml
Phospho-delta Opioid Receptor (Ser363)  磷酸化D型阿片受體抗體    規(guī)格:0.1ml
LIF  白病抑制因子抗體    規(guī)格:0.1ml
phospho-DAXX (Ser671)  磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體    規(guī)格:0.1ml
MCSF/M-CSF  巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體    規(guī)格:0.1ml
MMP-15  基質(zhì)金屬蛋白酶-15抗體    規(guī)格:0.1ml
CHRNA2(neuronal)  煙堿型乙酰膽堿受體A2(神經(jīng)型)抗體    規(guī)格:0.1ml
phospho-NFKB p65(Ser529)  磷酸化細(xì)胞核因子抗體    規(guī)格:0.1ml
Phospho-NMDAR2B (Tyr1336)  磷酸化谷氨酸受體2B抗體    規(guī)格:0.1ml
phospho-CDKN1B/P27kip1 (Thr187)  磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑抗體    規(guī)格:0.1ml
PAK4  p21激活激酶4抗體    規(guī)格:0.1ml
PDPK1  3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體    規(guī)格:0.2ml
PLC beta 3  磷酯酶Cβ3抗體    規(guī)格:0.1ml
Phospho-PKR (Thr451)  磷酸化蛋白激酶R抗體    規(guī)格:0.1ml
Peptide YY/PYY  酪酪肽抗體    規(guī)格:0.2ml
phospho-ROCK2(Thr396)  磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體    規(guī)格:0.1ml
SHC  SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體    規(guī)格:0.2ml
Phospho-MYPT1 (Thr853)  磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗體    規(guī)格:0.1ml
Streptococcus suis 2  2型豬鏈球菌菌體蛋白抗體    規(guī)格:0.2ml
phospho-ANTXR1(Tyr382)  磷酸化瘤管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體    規(guī)格:0.1ml
phospho-TOPO II Alpha (Ser1106)  磷酸化DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體    規(guī)格:0.1ml
Phospho-Tuberin/TSC2(Ser1418)  磷酸化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體    規(guī)格:0.1mlWestern 印跡膜洗膜液    81211-250    250mL
RNase 抑制劑 ( 小鼠源 )    130699-3000    3000U
5g    牛血清白蛋白    
250mg    Calcein Blue     
100mL    非凍型血液 DNA 保存液    
100mL    茜素紅 S 染色試劑盒    
一氧化氮檢測(cè)試劑盒 ( 化學(xué)法 )    18-0620-100    100 T
溴化乙錠干粉 (EB)    100808-1    1g
100 次    神經(jīng)氨酸酶檢測(cè)試劑盒    
100 次    DNA 快速連接試劑盒    
500 次    BCA 法蛋白定量試劑盒    
1套    克必隆 eTS miRNA cDNA 文庫(kù)構(gòu)建試劑盒    
8- 氧代鳥嘌呤 DNA 糖基化酶    130645-80    80U
地高標(biāo)記 dUTP 溶液    100921-25    25μL
250U    Taq 酶抗體    
10mg    碘化丙啶苯    
100mL    胰酶消化液 ( 含 EDTA)    
100 次    雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒    
鏈霉親和素,AP 標(biāo)記    131022-0.5    0.5mL
即用型易錯(cuò) PCR 試劑盒    101005-100    100 次
300μL    兔抗雞 IgY,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記    
50U    Furin 蛋白酶    
100mg    遺傳    
10 塊    LB 平板培養(yǎng)基 (Tet 抗性 )    

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