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詳細(xì)介紹
過(guò)表達(dá)CADM1的骨肉瘤細(xì)胞株；U-2os-CADM1價(jià)格質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于A(yíng)TCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
過(guò)表達(dá)CADM1的骨肉瘤細(xì)胞株；U-2os-CADM1價(jià)格操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀(guān)察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀(guān)察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng)
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞屬專(zhuān)利保藏，其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
總 SOD 活性檢測(cè)試劑盒 (NBT 法 )100 次
驢抗山羊 IgG，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記60μL
鏈霉蛋白酶 E250mg
超氧化物歧化酶測(cè)試盒48 T
CAS9003-99-0乳酸過(guò)氧化物酶10mg
131160-0.1山羊抗小鼠 IgG，異硫氰酸熒光素標(biāo)記0.1mg
3080-250植物 RNAout250 次
NAC( 抗氧化劑 )2g
5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚基磷 (BCIP)100mg
心肌細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
SDS 溶液 ,10%，電泳100mL
21-0420-5雪旺細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
17-001-10000.5 mL RNase-free 離心管1000 支
PRMI1640 培養(yǎng)基100mL
BL21（DE3）菌種1mL
Nicotinamide(Sirt1 抑制劑 )10g
非凍型血液 RNA 保存液100mL人丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人白介素3(IL-3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人NK細(xì)胞ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
犬血栓素B2(TXB2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛乳糖合成酶(LS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
裸鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16) ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞傳染性貧血毒（CIAV）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠脂多糖（LPS）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠維生素A(VA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠多巴胺(DA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
大鼠P21蛋白（P21）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
23-0540-1NS-398(COX-2 抑制劑 )1mg
100919-100消解酶 ( 溶細(xì)胞酶 ) 干粉100mg
RNAi，RNA 干擾載體及基因片段等系列2 μg
常用PCR引物100uL
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