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人結腸癌轉基因細胞;RKO-E6價格

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  • 品牌 ATCC
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更新時間:2017-01-09 14:12:41瀏覽次數:323

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產品簡介

人結腸癌轉基因細胞;RKO-E6價格售后:收到細胞后7天,如發(fā)現細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書面質量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細介紹

人結腸癌轉基因細胞;RKO-E6價格質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

人結腸癌轉基因細胞;RKO-E6價格操作步驟:

1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性  上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  RKO-E6細胞系是用脂質體法轉染pCMV-E6的結腸癌RKO細胞系。 該細胞含有穩(wěn)定整合受控於巨細胞病毒啟動子的人乳狀病毒(HPV)E6癌基因。 RKO-E6細胞系和它的母系RKO一起可用于研究p53缺失引起的細胞參數改變p53介導的轉錄和凋亡等。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  優(yōu)質胎牛血清,10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

130590-100小鼠抗 HPC4 標簽蛋白單抗100μL
Poly r(A)100mg
一步法96 孔板單菌落質粒DNAout( 離心法)5次
10 μL RNase-free 白吸頭 ( 盒裝已滅菌 )96 支
魚類種屬鑒定 PCR Mix100 次
22-0450-100MEQ,(6- 甲氧 -N- 乙基喹啉碘 )100mg
T4 DNA 連接酶1000U
羧芐青1g
CAS9001-12-1膠原酶Ⅱ型100mg
130519-2磁珠 2mL
微量蛋白沉淀試劑盒50 次
生物素化蛋白 A1mg
0.5mL DNA 離心超濾管 (9-15 KD)1個倉鼠卵巢細胞英文名稱:Lec1
NEC(人食管細胞)5×106cells/瓶×2
MN-c, 小鼠質神經元gersion
CHL(倉鼠肺細胞)5×106cells/瓶×2
人心房肌細胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
Poly-D-lysine溶液規(guī)格:2mggersion
G1(發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細胞)5×106cells/瓶×2
HE瓊脂/Hektoen瓊脂培養(yǎng)基/腸道病菌培養(yǎng)用瓊脂/Hektoen Enteric Agar用于沙門氏菌屬和志賀菌屬的分離培養(yǎng)250克國產/進口
牛津瓊脂基礎/OXA基礎/Oxford Agar Base單增李氏菌的選擇性分離250克國產/進口
A3(人T淋巴細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠胃細胞英文名稱:MFC
人胚腎細胞英文名稱:AAV-293
大鼠肝細胞英文名稱:CBRH-7919
Molt-4/急性淋巴母細胞白血病細胞株國產gersion
BGC823(人胃細胞)5×106cells/瓶×2
WS瓊脂/Wuhan Salmonella Agar分離沙門氏菌和志賀氏菌用250克國產/進口
戊烷脒多粘菌素B瓊脂基礎炭疽桿菌的培養(yǎng)及初步鑒定250克國產/進口
QGY-7701(人肝細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠肺細胞英文名稱:LLC
人肺大動脈內細胞*培養(yǎng)基100mL
SW 1353(人骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2
III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
人淋巴細胞分離液 1.077200mL
131129E-100植物種屬鑒定 PCR Mix 5100 次
L- 酪氨酸25g
L-Arginine(NO 前體 )5g
Southern Marker Oligo(DIG)20 次
Earle 溶液100mL
80814-200Bradford 法蛋白定量試劑盒200mL
葡萄糖 -6- 磷酸脫氫酶測試盒24 T

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