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Cas9穩(wěn)定表達的人食管癌細胞;EC109-Cas9-573說明書

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更新時間:2017-01-09 11:37:36瀏覽次數(shù):322

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

Cas9穩(wěn)定表達的人食管癌細胞;EC109-Cas9-573說明書采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。

詳細介紹

Cas9穩(wěn)定表達的人食管癌細胞;EC109-Cas9-573說明書現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。

產(chǎn)品名稱Cas9穩(wěn)定表達的人食管癌細胞;EC109-Cas9-573說明書
用途僅用科研
保存條件4℃保存一年;-20℃長期保存

細胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞是采用慢病毒感染的方式使EC109細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法  1:3傳代;2~3天1次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR  Amelogenin:x,x;CSF1PO:10,10;D12S391:19,20;D13S317:11,11;D16S539:12,12;D18S51:12,16;D19S433:13,13;D21S11:30,30;D2S1338:17,20;D3S1358:17,17;D5S818:12,12;D6S1043:13,13;D7S820:8,12;D8S1179:13,14;;FGA:25,25;Penta E:16,16;TH01:9,9;TPOX:8,8;vWA:16,17;
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?br />操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。動物 DNAout250mL
DNA 稀釋液10mL
120403-300蝦堿性磷酸酶300U
100409-56nt 隨機引物,0.5μg/μL5μg
Western 印跡膜封膜液 ( 尼龍膜 )100mL
過氧化氫定量分析試劑盒 ( 水兼容性 )250 T
戊巴比妥5g
Lillie 甲醛中性固定液250 mL
CAS73-22-3L- 色氨酸5g
19-0060-100 F12 培養(yǎng)基 ( 含 10% 胎牛血清 )100mL
60306-200柱式血液 DNAout200 次
氫化可5g
D- 生物素 ( 維生素 H)1g
質(zhì)粒 ( 載體 ) 系列產(chǎn)品2μg
增強型天狼猩紅染色試劑盒100mL
18-0610-24一氧化氮合成酶測試盒24 T
81104-1000超快核酸銀染試劑盒1000mL
神經(jīng)氨酸酶 ( 梭菌 )4mg
DNA 堿性膠上樣液 ,6×10mL
Bradford 法蛋白定量試劑盒200mL小鼠內(nèi)臟脂肪細胞*培養(yǎng)基100mL
人結(jié)腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL
Western中低分子量蛋白Marker20次國產(chǎn)
MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14)5×106cells/瓶×2
A875(人黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2
膽鹽七葉苷瓊脂/Bile Esculin Agar腸球菌和腸道致病菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
液體沙氏培養(yǎng)基/沙堡氏4%葡萄糖瓊脂肉湯/薩布羅氏葡萄糖瓊脂肉湯/SDB霉菌和酵母菌的增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
L1210(小鼠白血病細胞)5×106cells/瓶×2
兔IgG-兔IgG5 x 1ml國產(chǎn)
麥角甾苷規(guī)格:20mg/支;98%
Sf-21(昆蟲細胞)5×106cells/瓶×2
Hepa 1-6(小鼠肝細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠氣管和支氣管上細胞*培養(yǎng)基100mL
L-Glutamine規(guī)格:100g
人膀胱細胞英文名稱:EJ
煌綠增菌液/亮綠增菌液/亮綠肉湯/Brilltant Green Enrichment Broth蛋與蛋制品中沙門氏菌檢驗250克國產(chǎn)/進口
大鼠骨細胞*培養(yǎng)基100mL
0.5M Tris-Cl(pH6.8)500ml國產(chǎn)
293T/胚腎細胞株國產(chǎn)
腺英文名稱:MA891瘤
克必隆 eTS miRNA RT-PCR 試劑盒10 次
130644-500甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶500U

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